8棒状杆菌属详解.ppt

棒状杆菌属 Corynebacterium 革兰阳性，一端或两端膨大呈棒状，无荚膜、无鞭毛，不产生芽胞 多为条件致病菌 致病菌：白喉棒状杆菌 形态 G+，菌体细长微弯，一端或两端膨大、有异染颗粒，常排列呈V、L形 培养特性 需氧或兼性厌氧，营养要求较高 BAP：有狭窄溶血环 亚蹄酸钾血琼脂平板：分3型，黑色菌落 吕氏血清斜面：灰白色、不透明、有光泽的S型菌落，异染颗粒明显。 生化反应 氧化酶＋ 葡萄糖＋、麦芽糖＋ 硝酸盐还原＋ 分型 亚蹄酸钾血琼脂平板划分菌落形态为重型、中间型和轻型，据K抗原划分血清型： 重型：13个血清型 中间型：4个血清型 轻型：40个血清型 抵抗力 对湿热抵抗力弱 抗寒冷和干燥 对青霉素、氯霉素、红霉素敏感 致病物质 白喉外毒素：β棒状杆菌噬菌体带有编码外毒素的tox基因, 在溶原阶段基因整合到染色体上即可产生 A亚单位和B亚单位 B亚单位有结合和转位功能 A亚单位上有1个催化区 作用靶：心肌和神经细胞 作用机制 A亚单位可使细胞延伸因子-2（EF-2）灭活，影响蛋白质的合成。 作用特点 毒性作用大，1分子能杀一个细胞 多种细胞，特别心肌、神经细胞均有毒素受体 肿瘤细胞对此毒素特别敏感，用于靶向治疗 所致疾病：白喉--急性呼吸道传染病 传染源：患者及带菌者 传播途径：飞沫或污染 临床表现 细菌--------上呼吸道粘膜， 生长繁殖，产生毒素, 细菌与毒素共同作用引起局部症状： 炎症，坏死，纤维蛋白渗出 假膜——窒息 毒素入血引起全身中毒症状 外周神经炎：膈肌麻痹--呼吸困难 声带麻痹--声音嘶哑 软颌麻痹--吞咽困难 心肌---心肌炎 感染后机体可获得牢固的免疫力 白喉杆菌的检测程序 微生物学检查法 标本：咽拭子 直接涂片镜检—形态，异染颗粒， 分离培养—BAP、吕氏血清斜面，亚碲酸钾平板 毒力鉴定—动物试验，Elek平板毒力实验 锡克试验(Schick test)：测定对白喉的免疫力皮肤试验 原理：毒素抗毒素中和反应 方法：注射毒素（毒性、蛋白质） 试验 加热破坏的毒素（无毒、蛋白质） 对照 结果：48小时观察结果， 有红肿 阳性反应 无免疫力 无红肿 阴性反应 有免疫力 应用：检查机体对白喉的免疫力 预防接种前的筛选与接种后效果观察 流行病学调查 Schick test结果分析 防治原则-与破伤风类似 预防 人工主动免疫：注射白喉类毒素（白百破三联疫苗） 人工被动免疫：注射白喉抗毒素 药物预防：如注射青霉素或口服红霉素 治疗 白喉抗毒素---皮肤试验、早期使用 抗生素 第二节 其他棒状杆菌 大多不产生外毒素 很少有异染颗粒 大多正常寄生于人体，为条件致病菌 本章要点 概念：异染颗粒、 Elek毒力平板试验、锡克试验(Schick test) 白喉棒状杆菌的所致疾病与致病机理、微生物学诊断方法与判断依据 思考题 Elek毒力平板试验为哪几种实验方法的叠加？类似的实验设计还有哪些？这些实验方案的巧妙之处在那里？ * * Neisser染色 Albert染色 吕氏血清斜面 100g/L葡萄糖肉汤（灭菌，pH7.4）1份小牛血清（或兔、羊、马血清）3份? 用无菌操作法将上述成份混合于灭菌三角烧瓶。无菌分装于15mm×150mm灭菌试管，每管3~5ml ，将试管斜置于血清凝固器内，间歇灭菌3天，。第1天徐徐加热85℃，维持30min，使血清凝固，置3℃温箱过夜；第2天和第3天再用85~90℃灭菌30min，取出后置4℃备用。 用于白喉棒状杆菌培养，观察异染颗粒。 标本 直接涂片染色镜检（革兰染色、异染颗粒染色） 吕氏血清斜面，35℃培养12~18h 亚碲酸钾血琼脂平板35℃培养24~48h 血琼脂平板35 ℃培养12~18h 观察菌落特点 吕氏血清斜面 涂片染色镜检 生化反应 毒力试验 涂片染色镜检（革兰染色、异染颗粒染色） Elek Test 沉淀线(阳性) 含100U/ml白喉抗毒素滤纸片 白喉杆菌菌苔 Elek平板试验 20%血清肉汤琼脂 37℃培养24~48h 试验侧 对照侧 本质 阴性反应 – –