生物技术基因工程2教案.ppt

pUC19 抗虫棉基因的转化过程 SSR ? 重复单元： 1~ 6bp,如 CA, CTCG ? 重复次数：5~ 30 次 ? 覆盖长度：10~300 bp ４、序列特征扩增区域 (SCAR) 　　建立在DNA测序基础上的分子标记。 先作RAPD、DNF\SSR分析，然后把标记片段克隆和测序，根据原片段两端的序列设计一对特定引物（通常16-24个碱基），再进行PCR特异扩增，这样就可把与原RAPD片段相对应的单一序列(位点)扩增出来。这样的DNA片段与原先的性状存在对应关系，就称为该性状的SCAR标记。 Random primer Random primer specific primer 1 specific primer 2 RAPD marker SCAR marker Sequencing 随机产物：多种 SCAR产物：一种 　　SCAR比RAPD和其它利用随机引物的方法在基因定位和作图中的应用更好，因为它有更高的可重复性（原因是使用的引物长）。 (三)建立在酶切和PCR基础上的分子标记 6、扩增片段长度多态性(AFLP)： 　建立在RFLP和PCR基础上的标记方法。 　其基本步骤是：把DNA进行限制性内切酶酶切，然后选择特定的片段进行PCR扩增，在测序胶上分开这些扩增产物并检测其多态性。 AFLP的实验过程 AFLP A