果蝇的饲养及其遗传性状的分析.docVIP

果蝇的饲养及其遗传性状的分析 一．实验目的 了解果蝇的生活史； 掌握果蝇的麻醉及观察方法； 通过实验学习掌握果蝇性别的鉴定方法； 了解果蝇的饲养方法； 仔细观察并记录实验室各品系果蝇的性状； 理解和验证伴性遗传和分离、连锁交换定律。 二．实验原理 果蝇的生活史及遗传学分析优点 果蝇属于昆虫纲，双翅目，与家蝇是不同的种。它的生活史包括：卵→幼虫→蛹→成虫。 果蝇的生活周期长短与温度关系很密切，30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡，低温则使它生活周期延长，同时生活力也减低，果蝇培养的最适温度20—25℃。 生长迅速，生活史较短，短时间内可获得大量子代； 容易饲养，在常温下以玉米粉做饲料就可使之生长繁殖； 染色体数目少，加之唾腺染色体巨大，是细胞学观察的好材料； 突变性状多，且多数是形态突变，便于观察。 果蝇杂交实验原理 红眼与白眼是一对相对性状，控制该对性状的基因（W）位于X染色体上，且红眼（+）对白眼（w）为完全显性。当红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时，无论雌雄均为红眼，F2中红眼:白眼=3:1，但雌蝇全为红眼，雄蝇中红眼:白眼=1:1；反交时F1中雌蝇为红眼，雄蝇为白眼，F2中红眼:白眼=1:1，雌蝇和雄蝇中的红眼与白眼的比例均为1:1。 正常翅（+）对残翅（vg）为显性，且为常染色体遗传。当正常翅与残翅杂交时，无论正交还是反交，F1全表现出正常翅，将F1自交，F2中出现性状分离，且理论性状分离比为3:1。 正常灰体（+）对黑檀体（e）为显性，且为常染色体遗传。当正常灰体（+）与黑檀体（e）杂交时，无论正交还是反交，F1全表现出灰体，将F1自交，F2中出现性状分离，且理论性状分离比为3:1。 三．实验内容及方法步骤 果蝇培养基的配制及培养指管的消毒 目前本实验室所用的果蝇培养基配方如下： A：白糖6.5g，琼脂1.0g，加100ml水，煮沸溶解。 B：玉米粉8.5g，加水50ml，混合均匀。 将B慢慢倒入A中，并不断搅拌混合，加热成糊状后，再加入少许酵母粉，少冷却后加入1ml丙酸，调匀后即可分装到事先经过高温灭菌锅灭菌后的指管中，以备接种培养。 原种培养 在作为新的留种培养时，事先检查一下果蝇有没有混杂，以防原种丢失。亲本的数目一般每瓶5—10对，移入新培养瓶时，须将瓶横卧，然后将果蝇挑入，待果蝇清醒过来后，再把培养瓶竖起，以防果蝇粘在培养基上。 原种每2－4周换一次培养基（按温度而定），每一原种培养至少保留两套。培养瓶上标签要写明名称，培养日期等，作为原种培养，可控制到10—15℃，培养时避免日光直射。 黑腹果蝇成虫雌雄的鉴别 在视体显微镜下可以观察到，雌雄果蝇成虫在在形态上有一些明显的区别，比如雌果蝇外生殖器较简单，有阴道板和肛上板等结构；雄果蝇外生殖器较复杂，有生殖弧，肛上板等结构。但通过这种辨认方法较繁琐，如图给出几种常见辨认方法： 比较项目 雄 雌 个体大小 较小 较大 腹部末端 较尖 钝圆 腹部背面条纹 3条黑色条纹，上两条窄，最后一条极宽，并延伸到腹面，致使整个腹部背面的后部分呈黑色 5条黑色条纹，彼此分开 性梳 第一对足的跗节基部有黑色性梳，形似小梳子，在显微镜下较明显 无 （4）果蝇杂交 1. 实验材料及仪器试剂 材料：野生型果蝇（+),白眼残翅果蝇（w），残翅果蝇（vg），黑檀体果蝇（e） 仪器：放大镜、显微镜、麻醉瓶、白瓷板、毛笔、记录本 试剂： 乙醚、酒精棉球、培养基 2.果蝇麻醉方法 麻醉前先在实验台上放一干净的白瓷板，取一麻醉瓶，在瓶塞棉球滴一滴乙醚，将指管口与麻醉瓶口对好，轻拍指管，使果蝇落入麻醉瓶中迅速塞好棉塞，等观察到麻醉瓶中果蝇不再乱飞打开瓶塞，将果蝇倒在白瓷板上，拿放大镜观察。麻醉程度的大小要依据实验需要而定，如要做杂交实验，不可过度麻醉，否则影响其生活能力；如要观察性状，可以深度麻醉，麻醉后，如果果蝇翅外展，表明已死亡；如果翅膀仍紧贴在背腹上，表明果蝇只是暂时处于麻醉状态。 3.实验步骤 挑选处女蝇：选择处女蝇时，先把亲本除去，收集10小时以内羽化出来的新果蝇，再把雌雄分开，这时得到的雌蝇应该都是处女蝇，如需验证，则先不放入雄蝇，3天后看其是否产卵，不产卵就是处女蝇了。挑选出白眼雌果蝇若干接入一只指管中编号为1，另外选出红眼雌果蝇若干接入另一只指管中编号2，挑选出黑檀体雌果蝇接入编号3的指管中，挑选出残翅雌果蝇接入编号4的指管中。 杂交：向1号指管中接入红眼雄果蝇若干只，向2号指管中接入白眼雄果蝇若干只，向3