第三章、发酵培养基设计教案.ppt

类胡萝卜素高产菌Y11的培养基的优化 郭秒,食品与工业发酵，2004 类胡萝卜素的作用：色素、营养保健 原培养基: 初步确定可能的培养基成分(以碳源为例) 通过单因子实验确定适宜的培养基成分(以碳源为例) 考虑到成本：乙酸钠是较为合适的碳源 进一步：乙酸钠的浓度2%比较好 结果： 碳源：乙酸钠 0. 2% 氮源：氯化铵 0.2% 酵母膏0.03% 无机盐: 复合无机盐0.05% 正交设计确定优化的配方 改进后培养基的发酵结果 改进后培养基 原培养基 摇瓶水平到反应器水平的优化配方 摇瓶、反应器培养基研究的两个层次 摇瓶——培养基设计的第一步 反应器—最终的优化的基础配方 例： 青霉素发酵 发酵摇瓶：玉米浆4%，乳糖10%，(NH4)SO4 0.8% 轻质碳酸钙1% 发酵罐:葡萄糖流加控制总量10-15%，玉米浆总量4-8% 补加硫酸、前体等 摇瓶发酵培养基和罐的基础培养差别很大 摇瓶优化配方：菌种筛选，反应器研究的基础 发酵罐：反应器水平, 可以得出最 终优化的基 础配方 pH控制摇床：反应器水平上的摇瓶研究 pH控制摇床在1, 3-丙二醇 发酵中的应用 1,3-丙二醇的用途： 最重要的用途是作为单体与对苯二甲酸丙二醇聚合生产聚酯聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT) 可作为增塑剂、洗涤剂、防腐剂和乳化剂等用于食品、化妆品和制药等工业 PTT的性能 -- + - ++ --- 成本 -- ++ + - --- 色彩密度 NA --- - ++ ++ 抗静电力 -- ++ - + + 日晒牢度 -- --- - ++ ++ 洗涤牢度 -- --- - ++ ++ 抗污染力 -- - ++ + + 磨损 NA + --- - ++ 丰满度 ++ - --- - + 弹性 NA + + - ++ 柔韧度 Spandex (Lycra) 莱卡、氨纶 Acrylic 亚克力 Nylon 尼龙、锦纶 PET 涤纶 PTT PTT最目前性能最好的纤维 被誉为21世纪的大型纤维 5、水 生理功能： 1）是微生物机体的重要组成部分 2）进行代谢反应的介质 3）营养物、代谢物、氧气等必须溶解于水后才能通过细胞表面进行正常的活动； 4）水的比热高，能有效吸收代谢过程中放出的热，使细胞内温度不致骤然上升；同时水又是热的良导体，有利于散热，可调节细胞温度。 ? 对于发酵工厂来说，恒定的水源是至关重要的，因为在不同水源中存在的各种因素对微生物发酵代谢影响甚大，特别是水中的矿物质组成对酿酒工业和淀粉糖化影响甚大。 ? 水源质量的主要参数包括pH值、溶解氧、可溶性固体、污染程度以及矿物质组成和含量。 6、前体 (precursor) 概念： ——指某些化合物加入到发酵培养基中，能直接被微生物在生物合成过程中结合到产物分子中去，而其自身的结构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而又较大的提高。 发现： ? 最早是从青霉素的生产中被发现的。 ? 加入玉米浆后，青霉素单位可从20U/ml增加到100U/ml； ? 玉米浆中含有苯乙胺，它能被优先合成到青霉素分子中，从而提高青霉素G的产量。 青霉素：分子量356 苯乙酸:分子量136 作用：前体有助于提高产量和组份 用量：前体的用量可以按分子量衡算，具体使用有个转化 率的问题 用法：前体使用时普遍采用流加的方法 前体一般都有毒性，浓度过大对菌体的生长不利 苯乙酸，一般基础料中仅仅添加0.07% 前体相对价格较高，添加过多，容易引起挥发和氧化， 流加也有利于提高前提的转化率 苯乙酸及其衍生物 苯氧乙酸 氯化物 氯化物 正丙醇 丙酸盐 ?-紫罗酮 ?-氨基丁酸 邻氨基苯甲酸 甘氨酸 青霉素G 青霉素V 金霉素 灰黄霉素 红霉素 核黄素 类胡萝卜素 L-异亮氨酸 L-色氨酸 L-丝氨酸 前体 产品 7、促进剂和抑制剂 (1)、促进剂： 促进剂是指那些非细胞生长所必需的营养物，又非前体，但加入后却能提高产量的添加剂。 ? 促进剂不是前体或营养物 ? 可影响正常代谢，或促进中间代谢产物的积累，或提高次级代谢产物的产量 例如 ◇ 巴比妥可增加链霉素产生菌的抗自溶能力，推迟自溶时间，增加链霉素积累。 ◇ 谷氨酸棒杆菌生产赖氨酸时，加入红霉素可提高产量25%以上。 20 16 10 4 4 6 20 1.5 2.87 2.50 2-4 1.6 1.2 4.4 2 许多真菌 许多真菌 许多真菌 许多真菌 许多真菌 许多真菌 绳状青霉 产气杆菌 米曲霉 泡盛曲霉 曲霉、桔青