14__蛋白质工程的崛起精要.ppt

一、蛋白质工程崛起的缘由 1．蛋白质工程崛起的缘由 (1)基因工程的实质：将一种生物的_____转移到另一种生物体内，后者可以产生它本不能产生的_______，进而表现出_________。 (2)基因工程的不足:在原则上只能生产自然界______的蛋白质。 2. 天然蛋白质的不足:天然蛋白质是生物在长期______过程中形成的，它们的__________符合特定_________的需要，却不一定完全符合_______________的需要。 进化 玉米中赖氨酸含量比较低 天冬氨酸激酶 （352位的苏氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺） 改造 改造 天冬氨酸激酶 （异亮氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸） 赖氨酸含量可提高数倍 例如： 改造 干扰素（半胱氨酸） 体外很难保存 干扰素（丝氨酸） 体外可以保存半年 3.蛋白质工程的目的： 生产符合人类生产和生活需要的蛋白质。 蛋白质工程的基本原理 1.目标：根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行分子设计。 2.原理: 改造基因(基因修饰或基因合成) 思考与讨论:对天然蛋白质进行改造，是通过直接对蛋白质分子进行操作来实现的吗？ 蛋白质工程并不是直接改造蛋白质，而是通过对基因操作来实现对天然蛋白质的改造，主要原因如下： ①任何一种天然蛋白质都是由基因编码的，改造了基因即对蛋白质进行了改造，而且可以遗传下去。如果对蛋白质直接改造，即使改造成功，被改造的蛋白质还是无法遗传的。②对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作，难度要小得多。 预期蛋白质功能→ 设计预期的___________→推测应有的___________→找到相对应的_____________________ 基因表达流程图 蛋白质工程流程图 3.流程： 蛋白质结构 脱氧核苷酸序列(基因) 氨基酸序列 讨论 １、怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？写出相应的碱基序列。 ２、确定目的基因的碱基序列后，怎样合成或改造目的基因？ 　　某多肽链的一段氨基酸序列是：……—丙氨酸—色氨酸—赖氨酸—甲硫氨酸苯丙氨酸—…… 回答 1. mRNA序列为： GCU（或C或A或G）UGGAAA（或G）AUGUUU（或C） 脱氧核苷酸序列： CGA（或G或T或C）ACCTTT（或C）TACAAA（或G） 回答 回答：确定目的基因的碱基序列后，就可以根据人类的需要改造它，通过人工合成的方法或从基因库中获取。 2.确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因 （DNA） 4.蛋白质工程的操作步骤 (1)从生物体中分离纯化目的蛋白。 (2)测定其氨基酸序列。 (3)借助核磁共振和X射线晶体衍射等手段，尽可能地了解蛋白质的二维重组和三维晶体结构。 (4)设计各种处理条件，了解蛋白质的结构变化，包括折叠与去折叠等对其活性与功能的影响。 (5)设计编码该蛋白质的基因改造方案，如定点突变。 (6)分离、纯化新蛋白，功能检测后投入实际使用。 是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类对生产和生活的需求。 概念： 蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。 项目 基因工程 蛋白质工程 实质 过程 目标 结果 联系 基因重组 基因修饰或基因合成 获取目的基因→ 构建表达载体→ 导入受体细胞→ 目的基因的检测与表达 预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→推测核苷酸序列→合成DNA →表达出蛋白质 定向改造生物的遗传特性，获得人类所需的生物类型或生物产品 定向改造或生产人类所需的蛋白质 生产自然界中已有的蛋白质 蛋白质工程是在基因工程的基础上,延伸出来的第二代基因工程。因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因的修饰或基因的合成。 生产自然界没有的蛋白质 蛋白质工程的进展与前景 成功的例子不多 通过对胰岛素的改造，已使其成为速效型药 正积极探索应用于微电子方面，制成的电子元件具有体积小、耗电少和效率高的特点 主要是因为蛋白质发挥其功能需要依赖于正确的空间结构，而科学家目前对大多数蛋白质的空间结构了解很少。 胰岛素改造 天然胰岛素制剂在储存中易形成二聚体和六聚体，延缓胰岛素从注射部位进入血液，从而延缓了其降血糖作用，也增加了抗原性，这是胰岛素B23-B28氨基酸残基结构所致。利用蛋白质工程技术改变这些残基，则可降低其聚合作用，使胰岛素快速起作用。该速效胰岛素已通过临床实验。 　 1、你知道人类蛋白质组计划吗？它与蛋白质工程有什么关系？我国科学家承担了什么任务？ 旁栏思考题 人类蛋白质组计划是继人类基因组计划之后，生命科学乃至自然科学领域