组织培养基础知识精要.ppt

六、植物组织培养的意义和作用 1.培育新品种的有效手段 （1）花药培养 （2）胚培养 （3）原生质体培养 （4）诱变与筛选 （5）基因工程的应用 2.种质资源保存的有效方法 3.去除病毒、真菌和细菌等病害和无性系的快速繁殖 4.促进有机物的生产和生理学的研究 小结 植物组织培养概念、分类、特点 植物组织培养的理论基础：细胞全能性、脱分化、去分化 植物组织培养的意义和应用 珍贵树种 无菌苗快速繁殖 无菌苗驯化 组培苗驯化移栽 茎、芽和小植株的规模培养 经济植物快速繁殖 （2）通过茎尖培养生产脱毒健康种苗：如草莓、香蕉、 甘蔗、马铃薯、大蒜等。 virus-free tissue 茎尖培养脱毒 脱毒马铃薯种薯生物反应器液体培养 2、用于植物遗传育种 包括种质资源离体保存；花粉花药培养产生单倍体；胚乳培养产生三倍体；胚培养拯救杂种胚克服远缘杂交障碍；原生质体培养进行体细胞杂交；植物体细胞无性系变异诱导和筛选；用于植物基因转移操作等。 种质资源的离体保存 体细胞无性系变异筛选 花粉、花药培养产生单倍体植株 幼胚拯救克服远缘杂交障碍 用于基因工程技术创造植物新种质 3、大规模植物细胞、组织和器官培养生产次生代谢物质； 4、用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等。 植物胚胎发生理论研究 生长发育特性研究 3、根据培养基的类型分为: （1）固体培养（Solid culture）: 琼脂、卡拉胶等固化。 （2）半液半固体培养(Semisolid Culture)：固液双层。 （3）液体培养(Liquid Culture)：震荡、旋转或静置培养。 液体培养的优点： A 不使用凝固剂，节约生产成本 B 营养吸收充分； C 操作过程简化。 固体培养： 液体培养 体胚液体培养 不同类型液体培养装置 液体培养体系 菠萝种苗液体培养系统 丹参毛状根培养 4、根据培养的过程分： （1）初代培养（第一代培养）：指将从植物体上分离下来外植体作第一次培养。 （2）继代培养：指第一次培养以后将培养物转移到新的培养基上进行培养。 三、植物组织培养的理论基础 1、植物细胞的全能性 1902年由Haberlandt提出，即植物体细胞在适当的条件下，具有不断分裂和繁殖、发育成完整植株的能力。 植物细胞全能性的证明是通过1958年Steward等胡萝卜根段细胞体胚发生试验及1964年Guha等进行的曼陀罗花药培养。 也可以理解：指植物的每个细胞都具有该植物的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。 细胞全能性的相对性 茎尖、根尖及形成层细胞 表皮细胞及各种薄壁细胞 筛管、导管、气孔保卫细胞 通常情况下不分裂， 但在受到外界刺激后可重新启动分裂 永久失去分裂能力的终端分化细胞 始终保持分裂能力 根据细胞类型不同从强到弱: 营养生长中心形成层薄壁细胞厚壁细胞（木质化细胞）特化细胞（筛管、导管细胞） 根据细胞所处的组织不同从强到弱： 顶端分生组织居间分生组织侧生分生组织薄壁组织（基本组织）厚角组织辅导组织厚壁组织 细胞全能性的相对性 植物细胞全能性理论是植物组织培养的核心理论。离体细胞具有生命的特征属性，在全能性的基础上，提供合适的营养和环境条件，离体细胞经历脱分化（dedifferentiation）和再分化（redifferentiation）过程，可形成再生植物。 细胞全能性的表达是通过细胞脱分化和再分化实现的，在大多数情况下，脱分化是细胞全能性表达的前提，再分化是细胞全能性表达的最终体现。 2、脱分化（Dedifferentiation）：也称去分化，指离体条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或不分化细胞的过程。 如叶柄基部的薄壁细胞成为离层细胞；伤害导致局部细胞形成愈伤组织。 影响脱分化的主要因素： （1）损伤。切割损伤的刺激，促使细胞增殖。 （2）在诱导愈伤组织时常加入生长素类，但同时配合细胞分裂素的效果可能更好。 （3）弱光或黑暗条件有利于脱分化中的细胞分裂。 （4）细胞位置。外植体本身的各类细胞可能对培养条件的刺激有不同的敏感性。 （5）外植体的生理状态。不同生理年龄和不同季节都会有不同的培养反应。 （6）植物种类的差异。 一般双子叶植物比单子叶植物及裸子植物容易。 在细胞脱分化过程