hbv的分类概要.pptx

HBV的分类 主讲 ：朱祥 2014.03.05;概要;1、主要的类型;具体的基因型（哺乳动物的）;八种HBV（人）的基因型的区别;;;【灰冠鹤】;2、世界性的分布;八种基因型分布的差异;3、HBV在中国;目的了解中国不同地区慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者中HBV基因型及基因亚型分布特点。方法从我国东部(山东、江苏)、西部(新疆)、南部(广东、广西)、北部(吉林、北京)及中部(河南、河北)5个地区的9个省、自治区、直辖市收集735份慢性HBV感染者血清样品,用本实验室建立的型特异性引物巢式聚合酶链反应法(nPCR)检测HBV基因型及基因亚型。;结果显示;结论;4、实验室用来研究乙肝感染的模型;4. 2 鸭dhbv感染模型 唐霓等［5］用不同日龄鸭接种dhbv建立急性和慢性感染模型，结果发现慢性感染的形成与幼鸭免疫系统发育尚未完善有关，即不同日龄的鸭肝细胞对dhbv易感性不同。姚云清等［6］用hbv-dna转染的原代鸭肝细胞与dhbv感染的原代鸭肝细胞进行比较，结果提示两者的复制与表达相似。朱清静等［7］用dhbv阳性血清反复攻击成功获得鸭乙型肝炎肝纤维化模型。鸭乙型肝炎并不能诱发肝细胞性肝癌，郝连杰［8］报道hans等经过对鸭乙型肝炎病毒基因结构的分析，证实鸭乙型肝炎病毒所有分离株中均存在一缺乏常规翻译起始密码子的x样开读框架，并不是没有x基因。;4.3 hbv部分片段的转基因小鼠模型 胡卫江等［9］应用受精卵原核显微注射的方法，制备了含有2.0拷贝hbv （adr亚型）基因组的转基因小鼠， 发现hbv基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传，并有病毒颗粒形成。刘红等［10］采用受精卵显微注射的方法，建立了hbv核心抗原（ayw亚型）转基因小鼠模型，核心抗原基因能够在小鼠肝脏中表达并可稳定遗传。金艳花等［11］采用原核显微注射法将质粒pcdna 3.1-pres/st注射入小鼠受精卵雄原核，成功获得了稳定遗传3′末端缺失的pres/s基因并表达pres2蛋白的转基因小鼠，命名为c57-tgn（pres/st）smmu。訾晓渊等［12］研究发现，f5代c57-tgn（hbv adr2.0）smmu小鼠具有基因组中稳定整合病毒dna，血清和肝组织中有病毒蛋白表达和病毒复制的特征，并具有一定的组织学变化。;4.4 dna疫苗免疫hbv转基因小鼠模型 oka等［13］用单剂量质粒ps及ps2-s 免疫30例hbv转基因小鼠，导致了其中28例hbsag的清除；而hbsag蛋白疫苗在注射7个月之后，仅导致29例hbv转基因小鼠中10例hbsag的清除，提示 dna疫苗免疫效果较好（？）。schirmbeck等［14］用hbv-dna疫苗及hbsag重组蛋白疫苗免疫h-2b小鼠及其同源hbv转基因小鼠，未诱导出免疫反应；但将免疫小鼠脾细胞转输入hbv转基因小鼠，则可导致血清hbsag滴度下降，抗hbsag抗体产生，并诱导出ctl反应，但未使肝脏hbsag转基因表达得到控制。;4.5 hbv免疫缺陷小鼠模型 brown等［15］将非肿瘤源性永生性人肝细胞株ihbv6.7移植到重组激活基因-2（rag-2）剔除鼠体内，建立了长期hbv病毒血症模型。ilan等［16］给正常小鼠高剂量射线全身照射以消除小鼠的免疫活性，再将严重联合免疫缺陷鼠的骨髓细胞移植给该鼠，最后将已感染hbv的人肝组织移植到该鼠肝脏，成功建立了与人自然感染hbv过程相似的hbv三聚体小鼠模型。;4.6 大鼠hbv感染模型 谭龙益等［21］将经磷酸钙沉淀的含3.2kb全序列hbv-dna的hbv-pcncx质粒直接导入大鼠肝脏，成功建立了hbv感染模型，在该鼠血清中检测到hbsag和hbeag，肝细胞中hbv-mrna及hbsag得到表达。wu等［22］将人肝细胞移植到有免疫活性的sd大鼠体内，再接种hbv，成功建立了hbv感染模型，3 w后即可在血清中检测到hbsag含量稳定上升， hbv-dna可至少持续60d；同时肝中出现hbv-rna，免疫荧光示成串的肝细胞含染色阳性的hbcag。蒋黎等［23］用与wu类似的方法成功建立了wistar大鼠乙型肝炎模型，人肝细胞型细胞角蛋白和hbsag在该模型肝组织中得到了表达。;4.7树鼩感染hhbv的模型 苏建家等［24］给树鼩接种hhbv的新鲜血清建立了树鼩感染hhbv的模型，在树鼩血清中可观察到hbsag及dane颗粒。yan等［25］用树鼩模型，进行了黄曲霉毒素b1（afb1）摄入和hbv感染诱发树鼩肝癌及其机制的系列研究，首次在树鼩体内证实了hbv与afb1有协同致肝癌作用。glebe等［26~27］用纯化的hbv感染原代树鼩肝细胞，可检测出hbv cccDNA、hbvmRNA、hbc