SNAP原理(v201007)概要.pptVIP

* * * * * * SNAP检测系统 读数仪 －快速检测平台 β内酰胺类 四环素类 庆大霉素 磺胺类 黄曲霉毒素M1 β-内酰胺酶 三聚氰胺 SNAPshot?读数仪 立刻判读 触控式屏幕 中文界面 连接电脑，数据保存及分析软件 批号 样品号 技朮人员编号 日期及时间 SNAP试剂盒使用要点 复原乳还原 还原用水温： 建议45oC±5oC, 不要70oC 蛋白质变性、美拉德反应 复原乳降温：建议至4oC-8oC, 模拟生鲜乳, 奶粉水合、排气 复原乳还原要充分，奶样中的不溶颗粒会影响流动速度，很大程度上会影响结果 吸取奶样 伸入奶样中吸取，不要吸取表面的奶样 预热和保温：试剂盒始终放置于加热器上 按压的时间： 读数：尽快读数，若呈色反应不完全（对照点颜色）可以继续放置于加热器上15秒-30秒后，立即读数 Activation Circle Early SNAP Late SNAP试剂盒使用要点 读数仪 β内酰胺试剂盒：点选“beta-lactam(青霉素类)” 其他试剂盒：点选 “other(其他）” β-内酰胺酶来源及检测技术 β-内酰胺酶检测 理化方法（高效液相色谱直接法，高效液相色谱间接法，碘量法3种） 微生物方法(杯碟法） 快速法（如SNAP，Twinsensor等） β-内酰胺酶检测 β-内酰胺酶（β-lactamase）单位定义及换算： β - 内酰胺酶IU(国际单位)定义：一单位酶能够在1分钟内pH 7.0， 25 °C的条件下水解1.0微摩尔的青霉素G,青霉素G 分子量：365.37，因此1IU酶能分解 365.37?g的青霉素G。 β - 内酰胺酶(青霉素酶)U（中国药检所，TCI）：1U青霉素酶可以分解1个单位青霉素G，1个单位青霉素G 等于0.6?g。 结论：1IU = 365.37/0.6 = 609U β-内酰胺酶检测 杯碟法 原理该方法采用对青霉素类药物绝对敏感的标准菌株，利用舒巴坦特异性抑制β-内酰胺酶的活性，并加入青霉素作为对照，通过比对加入β-内酰胺酶抑制剂与未加入抑制剂的样品所产生的抑制圈的大小来间接测定样品是否含有β-内酰胺酶类药物。 检出限：0.5－4U/ml (0.25-6.6IU/L) 检测时间：60小时 β-内酰胺酶检测 原理： 在奶样中添加一定量的β-内酰胺抗生素，经一定时间和温度的反应，如样品中含有β-内酰胺酶，奶样中的抗生素被β-内酰胺酶催化水解，抗生素消失或浓度降低。再采用SNAP抗生素试剂盒检测奶样，如未检出抗生素，则奶样中含有β-内酰胺酶；如检出抗生素，则奶样中不含β-内酰胺酶。 试剂及材料 装有β-内酰胺酶检测试剂的西林瓶，试剂为拟β-内酰胺类抗生素化合物。 SNAP β-内酰胺类抗生素检测试剂盒。 设备 SNAP配套加热器(45℃± 5℃)。 SNAP读数仪（备选）。 β-内酰胺酶快速检测－ SNAP 间接法 β-内酰胺酶快速检测－ SNAP 间接法 检测步骤 吸取奶样 打开装有β-内酰胺酶检测试剂的西林瓶盖，吸取1ml奶样加入该试剂瓶中，使试剂在奶液中溶解。 孵育样品 将含有试剂和奶样的西林瓶放置到加热器的加热板上，在45℃± 5℃，保持20分钟。 保温结束，将西林瓶移至2-8C至少10分钟，如不能及时检测，置于4℃冰箱保存，2小时内检测。 注: 如需要，可一次性在加热板上孵育多个样品，回温待用。 应用SNAP?抗生素试剂盒进行下步操作 检出限 进样 1ml：0.5-1IU/L 进样1.5ml: 0.25-0.5IU/L 注：卫生部公布的杯碟法检出限为 4U/ML=6.7IU/L，实际检出限为0.5-10IU/L， 质检总局中国检科院检出限0.25IU/L 结果判定 (与抗生素检测相反) 读数仪： 读数阳性(Positive,ratio1.05) : β-内酰胺酶阴性 读数阴性(Negative,ratio≤1.05) : β-内酰胺酶阳性 目测： SNAP试剂盒阳性：β-内酰胺酶阴性。 SNAP试剂盒阴性：β-内酰胺酶阳性. β-内酰胺酶快速检测－ SNAP 间接法 三聚氰胺及检测 三聚氰胺及检测 限量值 婴幼儿配方乳粉：1mg/kg (1 ppm) 液态奶（包括原料乳）、奶粉、其他配方乳粉：2.5mg/kg(2.5ppm) 含乳15%以上的其他食品：2.5mg/kg 液态原奶 液态原料奶要求限量 成品 成品限量 0.125 婴儿奶粉 1 0.310 奶粉及配方奶粉 2.5 2.5 UHT 2.5 三聚氰胺及检测 标准检测方法?GB/T22388?