生物化学核酸解析.ppt

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第3章 核 酸 3.1 核酸的组成成分 3.1.1 戊糖 3.1.2 含氮碱 3.1.3 核苷 3.1.4 核苷酸 3.2 核酸的一级结构 3.3 DNA的二级结构 3.3.1 双螺旋结构模型和试验依据 3.3.2 DNA双螺旋结构模型的要点 3.3.3 DNA二级结构的其他类型 3.4 DNA的高级结构 3.4.1 环状DNA的超螺旋结构 3.4.2 真核生物染色体的结构 3.5 DNA和基因组 3.5.1 基因和基因组概念 3.5.2 病毒和细菌基因组的持点 3.5.3 真核生物基因组的特点 3.6 RNA的结构和功能 3.6.1 tRNA 3.6.2 rRNA 3.6.3 mRNA和hnRNA 3.6.4 sn RNA和snoRNA 3.6.5 asRNA和 RNAi 3.7 核酸的性质 3.7.1 一般理化性质 3.7.2 紫外吸收性质 3.7.3 核酸结构的稳定性 3.7.4 核酸的变性 3.7.5 核酸的复性 3.7.6 核酸的分子杂交 3.8 核酸的序列测定 核酸的发现和研究简史(阅读) 核酸的结构与功能比较复杂,分子很不稳定,在4类生物大分子中,它的研究开始最晚; “蛋白质”一词最早于1838年由J.Berzelius提出,该词从希腊文“proteios”衍生而来,意思是首要的物质; “核酸”这个词的出现比“蛋白质”一词晚半个世纪,然而对它的研究却改变了整个生命科学的面貌,并由此而诞生了分子生物学这一当今发展最迅速、最有活力的学科。 1. 核酸的发现(阅读) 1868年瑞士青年科学家F.Miescher由脓细胞分离得到细胞核,并从中提取出一种含磷量很高的酸性化合物,称核素(nuclein),即现在所知的DNA。 Miescher被认为是细胞核化学的创始人和DNA的发现者; Miescher的工作移其继任者所继续。如,R.Altmann发展了从酵母和动物组织中制备不含蛋白质的核酸的方法,核酸这个名称就是由Altmann在1889年最先提出来的;(待续) 胸腺的细胞核特别大,酵母的细胞质很丰富,这是两种提取核酸的极好来源,因此这两种核酸也就研究得最多。 O.Hammars于1894年证明酵母核酸中的糖是戊糖,15年后由P.A.Levene和W.A.Jacobs鉴定是D-核糖。曾认为胸腺核酸中的糖是已糖,直至1929年才由Levene和Jacobs确定为2-脱氧-D-核糖; 两类核酸的碱基也有差别,在19世纪末和20世纪初分别得到鉴定,但对它们化学本质的差别还不清楚。 2. 核酸的早期研究(阅读) Hoppe-Seyler认为核素“可能在细胞发育中发挥重要作用”。1885年细胞学家O.Hertwig提出,核素可能负责受精和传递遗传性状; 1895年遗传学家E.B.Wilson推测,染色质与核素是同一种物质,可作为遗传的物质基础。但随后核酸的化学研究却偏离了最初的正确方向; 核酸中的碱基大部分由Kossel及其同事所鉴定。1910年因其在核酸化学研究中的成就而授予位诺贝尔医学奖,但他却认为决定染色体功能的是蛋白质,因而在获奖后转而研究染色体蛋白质;(待续) Levene在鉴定核酸中的糖以及阐明核苷酸的化学键中作出了重要贡献,但他的“四核苷酸假说”严重阻碍核酸研究达30年之久。1912年他提出核酸中含有等量的4种核苷酸,核酸是由四核苷酸单位聚合而成。按照此假说,核酸只是一种简单的高聚物,从而使生物学家失去对它的关注。(待续) 理论研究的重大发展往往首先从技术上的突破开始。20世纪40年代,T.Caspersson的显微紫外分光光度研究,J.Brachet的组织化学实验,A.L.Dounce的亚细胞部分的分离以及J.N.Davidson的化学分析结果都有力证明DNA存在于细胞核,RNA存在于细胞质,它们都是动物、植物和细菌细胞共同的重要组成成分。碱基成分的精确测定推翻了“四核苷酸假说”,并证明了核酸的高度特异性。 3. DNA双螺旋结构模型的建立(阅读) 20世纪上半叶,数理学科进一步渗入生物学。生物化学本身是一门交叉学科,也就成为数理学科与生物学之间的桥梁。数理学科的渗入不仅带来了新的理论和思想方法,而且引入了许多新的技术和实验方法。 1953年J.D.Watson和F.Crick提出DNA双螺旋结构模型,就是在学科融合的背景下产生的。该模型的提出被认为是20世纪自然科学中最伟大的成就之一,它给

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