CAS技术重点分析.pptVIP

CRISPR/Cas9 Timeline of genome engineering research CRISPR/Cas9 CRISPR/Cas9是细菌和古生菌一种特殊的防御系统，能够有效地抵抗噬菌体和外界各种基因元件（如质粒）对其造成的干扰。 Type II 基因座 以产脓链球菌的典型Type II CRISPR/Cas为例，其基因座结构可分别三部分， 5 端为 tracrRNA 基因。 中间为一系列 Cas蛋白编码基因，包括 Cas9、 Cas1、 Cas2 和Csn2。 3 端为 CRISPR 基因座，由启动子区域和众多的间隔序列(spacers)和重复序列(repeats)顺序排列组成。 Cas9 protein function Cas nuclease has: ①RNA binding domain; ②an α-helical recognition lobe; ③a PAM-interacting site. ④a nuclease lobe: NHN：负责切割与crRNA互补的链 RuvC：负责非互补链的切割 因此，将 RuvC 或是 NHN 活性突变后Cas9只有单链切割活性，类似于切口酶 Adaptive immunity involves three phases（作用机理） （1）CRISPR的高度可变的间隔区的获得：外来