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又称 ,指利用分子生物学和基因工程的手段,将某种生物的基因转移到其他生物物种中,使其出现原物种不具有的新性状的技术。 2.步骤 获取目的基因 体外重组DNA分子 导入受体细胞中 筛选与鉴定 问题: 获取目的基因的方法有哪些? 什么是逆转录?发生在哪些生物体内? 重组DNA是将目的基因与什么结合? 常用的载体是?什么是质粒? 用什么方法将重组DNA分子导入受体细胞? 为什么需要筛选和鉴定? ?转基因生物和转基因食品 转基因生物:由于目的基因导入,引起原有遗传物质组成改变的生物。 包括转基因植物转基因动物和转基因微生物。 转基因食品:用转基因生物生产或制造的食品、食品原料以及食品添加剂等。 合作探究 基因工程成功的标志是什么?他的产物属于哪种化合物? 拓展延伸 你认为转基因食品有哪些优点与缺点? 作业检测 ★1、基因工程的正确操作步骤是( ) ①体外重组DNA分子 ②将重组DNA分子导入受体细胞 ③筛选和鉴定 ④获取目的基因 A.③④②① B.②④①③ C.④①②③ D③④①② ★★2、下列关于转基因生物安全性的叙述,错误的是( ) A.种植转基因作物应与传统农业种植区隔离 B.转基因作物被动物食用后,目的基因会转入动物体细胞中 C.种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性 D.转基因植物的目的基因可能转入根际微生物 再见 基因操作的工具 —限制性核酸内切酶(简称限制酶) 基因操作的工具 目前常用的运载体有: 1)质粒(最常用) 2)噬菌体 和某些动植物病毒 基因工程的“四步曲” 抗虫的基因来自苏云金杆菌。苏云金杆菌形成的伴胞晶体是一种毒性很强的蛋白晶体,能使棉铃虫等鳞翅害目虫瘫痪致死。科学家将编码这个蛋白质的基因导人作物,使作物自身具有抵御虫害的能力。 抗虫害的玉米 反对派的观点 一英国科学家声称,转基因马铃薯会减弱老鼠免疫系统功能; 美国康乃尔大学也发现,转基因玉米会危害蝴蝶幼虫及其相关生态环境。 环保团体认为这种违反自然的转基因作物及产品,未经长期安全测试,长期食用可能对人类及生态环境造成负面影响。 尤其是注重环境和生态保护的欧盟国家,对转基因作物更加排斥,因而抵制美国(GMO)产品的进口。 被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端? 思考: 黏性末端 黏性末端 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 练习使用EcoRI 剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因 黏性末端 2.基因的针线—DNA连接酶 基因操作的工具 磷酸二酯键 磷酸二酯键 黏合只能使互补的碱基连接起来 问: 黏性末端黏合的是什么部位? 问:基因的针线--DNA连接酶连接的是什么部位? 脱氧核糖与磷酸之间化学键(磷酸二酯键) 使用DNA连接酶制作重组DNA分子 甲片段 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT 乙片段 GGCATCTTAA AATTCCGTAG 重组DNA分子 GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因(如人的胰岛素基因)怎样才能导入受体细胞(如大肠杆菌细胞)? 3.基因的运输工具——运载体 基因操作的工具 大肠杆菌的质粒 : 基因操作的工具 质粒的特点 1、存在于许多细菌以及酵母菌等生物的细胞中 2、拟核或细胞核外能自主复制的小型环状DNA分子 3、质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用 4、质粒的复制能在宿主细胞内完成 1、能够在宿主细胞内复制并稳定保存; 2、具有一个或多个限制酶切点以便与外源基因相连; 3、具有标记基因,便于进行筛选; 4、对宿主细胞无毒害作用。 运载体应该具有什么特点呢? 提取目的基因 1 目的基因与运载体结合 2 将目的基因导入受体细胞 3 目的基因的检测和鉴定 4 基因工程基本步骤 1、提取目的
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