第四章细菌和噬菌体的遗传解析.ppt

第四章 细菌和噬菌体的遗传分析 解释： 此品系中， F因子整合到了细菌染色体上，与F-细胞接合后将供体染色体的一部分或全部传递给F-受体，当供体和受体的等位基因带有不同的遗传标记时，可观察到它们之间发生重组，频率可达到10-2以上，称为高频重组品系（菌株）。但却很少使F-细菌转变成F+细菌。 The plaque assay for bacteriophage analysis. 2 . 温和噬菌体: 吸附 溶菌周期 - uv诱导 细菌裂解 溶源周期 如?噬菌体: 原噬菌体 Electron micrographs of phage lambda left and the DNA isolated from it right . 时间（分钟） 转移的基因 〈9 - 9 azir 11 azir tonr 18 azir tonr lac+ 24 azir tonr lac+ gal+ T 0：杂交开始； T 8分钟内，无重组菌落出现； T 9分钟，有少量azir菌落，但仍为tons。 T 11分钟时，开始出现tonr菌落； T 18分钟时，出现lac+菌落； T 24分钟时，出现gal+菌落。 1. 中断杂交实验结果 The progressive transfer during conjugation of various genes from a specific Hfr strain of E. coli to an F- strain. Conversion of F+ to an Hfr state occurs by integrating the F factor into the bacterial chromosome. （1）不同的非选择标记进入受体且重组的时间不同，但都是稳定的； （2）各基因的重组频率随着时间的增加 而增加，直至极值； （3）按时间顺序，先重组和后重组的基因，重组率的极值在逐步减少； 2. 中断杂交技术作图 中断杂交技术（interrupted mating technique ：根据供体基因进入受体细胞的时间顺序可绘制连锁图。 距离单位：分钟 Hfr细菌的染色体从原点 Origin, O 开始，以线性方式进入F-细菌，基因进入F-有一定的时间顺序。每一次较远基因的转移，都意味着较近基因也要一同转移，因此，越早进入的基因，离原点越近，所能达到的重组频率也越高；越晚进入的基因，离原点越远，所能达到的重组频率也越低。 O azi ton lac gal 0 9 11 18 25 A time map of the genes studied in the experiment 3. F因子最后转移 如果Hfr × F-杂交一直进行到2小时再中断，某些F-受体转变为Hfr,即F因子也转移到受体，并使之成为Hfr供体，但是频率很低，说明F因子离原点最远。 O azi ton lac gal F 0 9 11 18 25 120 Hfr菌株染色体上F因子的转移造成了高频重组。由于F因子离原点最远，转移频率很低，所以很少使F-变成Hfr或F+。 4、 大肠杆菌染色体是环形的 不同Hfr菌株进行中断杂交实验，基因转移的顺序、起点和转移方向各不相同。 推断大肠杆菌的染色体为环形，而F因子在细菌染色体上有许多插入位点，且插入方向不同。 Hfr H o thr azi lac tsx gal trp mal xyl metB thi F C o tsx lac azi thr thi metB xyl mal trp gal F J4 o thi metB xyl mal trp gal tsx lac azi thr F P72 o metB thi thr azi lac tsx gal trp mal xyl F Trp mal Gal xyl tsx metB lac thi azi thr C P72 H J4 a The order of gene transfer in four Hfr strains, suggesting that the E. coli chromosome is circular. b The point where transfer originates O is identified in each strain. 七、 细菌的交换和重组 F-内基因子，（endogenote 供体外基因子，（exogenote） 供体外基因子 F-内基因子 部分二倍体 partial diploid 细菌的交换和重组的特点 F-受体很少得到完整的F因子，大多数重组子仍为F-。