蛋白指纹图谱技术及检测报告解读要点解读.pptVIP

* Often purification on-spot is just not possible in complex samples, too many similar proteins of a close molecular weight mean that additional purification strategies must be explored to enrich and isolate the protein of interest so it is the primary species in the sample. * Often purification on-spot is just not possible in complex samples, too many similar proteins of a close molecular weight mean that additional purification strategies must be explored to enrich and isolate the protein of interest so it is the primary species in the sample. 蛋白指纹图谱技术 蛋白质组学-蛋白指纹图谱 蛋白质的分离技术 磁性微球（Magnetic Beads） 质谱技术 基质辅助激光解吸附质谱技术 (MALDI-TOF-MS) 表面增强激光解吸/电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS） 蛋白指纹图谱仪的原理是利用激光脉冲辐射使芯池中的分析物解析形成荷电离子，跟据不同质荷比这些离子在仪器场中飞行的时间长短不一，由此绘制出一张质谱图案。 其阅读器的准确率为氢原子的十分之一，这表明蛋白指纹图谱仪使医院进入原子级别的诊断世纪。 将一个人的测定图谱与正常人或疾病蛋白指纹图谱库中某种疾病（如肿瘤、老年性痴呆等）的图谱相对照，就能知道这个人的图谱是正常或是患有某种疾病（如肿瘤）。 什么是蛋白指纹图谱技术 蛋白指纹图谱技术不同于只能单一指标分析的传统肿瘤标 志物，通过对蛋白质动态、全景的分析，将病人疾病早期最 微小基因表达产物（蛋白质或多肽）系统地分析，获得待检 标本中各种蛋白的含量和蛋白质分子量等信息，绘制成蛋白 指纹图谱，通过计算机软件与正常人、亚健康状态人群、良 性疾病和癌症病人的指纹图谱库对照，比较分析差异，就能 快速、敏感和特异地发现和捕获新的与疾病相关的蛋白。 为何需要医用质谱（蛋白指纹图谱仪） 目前肿瘤检测项目： 1、传统肿瘤标志物检测（肿瘤十二项、肿瘤八项） 优点：采用较成熟的双抗夹心化学发光检测法 不足：假阴性检双抗夹心法的假阴性问题：双抗体夹心法,属于非竞争 结合测定,它是检测抗原最常用的方法(生化占90%),适用于检测分子中 具有至少两个抗原决定簇,如丢失一个抗原决定簇,会产生假阴性. 为何需要蛋白指纹图谱技术检测? 发光 放射 荧光 酶标 生化仪 质谱仪 （+） （+） 生化仪 质谱仪 （+） （-） 抗体组—质谱仪检测解决假阴性问题 1 10 5 15 1 10 5 IF 9.9 MCP Xu Y, Liu JD, Li N. A novel assay for prognostic biomarker of gastric cancer with lymph node metastases. Molecular Cellular Proteomics. 2006, 5: 357. 填补国际空白 检测的特异性和敏感性高 病种 传统肿瘤标志物技术 肿瘤蛋白指纹 检测项目 敏感性 特异性 敏感性 特异性 肝癌 甲胎蛋白（AFP） 43 46 91 89 肺癌 神经元特异性烯醇化酶（NSE） 65 51 82 95 胃癌 癌胚抗原（CEA） 91 94 前列腺癌 前列腺特异性抗原（PSA） 89 20～40 83 97 乳腺癌 癌抗原（CA153） 23 69 93 91 卵巢癌 癌抗原（CA125） 45 52 99 99 肠癌 癌胚抗原（CEA） 60 23 83 92 胰腺癌 癌抗原（CA199） 69 70 82 85 膀胱癌 93 87 鼻咽癌 92 97 食道癌 84 91 喉癌 97 97 中华检验医学杂志; 2004，27：706-709 * 目前肿瘤检测项目： 2、基因检测（肿瘤超早期筛查） Genomics DNA: What could happen 基因组学 可能发生 mRNA: What mi