红细胞血型检测精要.ppt

红细胞血型检测 * 应用 ★ABO疑难血型的鉴定 ★发现ABO血型新等位基因 ★对于ABO基因突变的研究 ★新生儿溶血病（HDN）的辅助诊断 ★某些疾病的病理研究 ★法医个体识别 红细胞血型检测 * 红细胞血型检测 * 结果的解释及处理 1.抗体筛查阴性，交叉配血相容： 绝大部分标本抗体筛查阴性，交叉配血也是相容的。 2.抗体筛查阴性，主侧交叉配合试验阳性 （1）复查血型 （2）主侧凝集类B抗原 （3）血清中可能含有一种ABO抗体，必要时可以做ABO亚型鉴定 红细胞血型检测 * 3.抗体筛查试验阳性，主侧交叉配合试验阳性 （1）自身对照试验阴性：受血者体内有同种不规则抗体。 （2）自身对照试验阳性：受血者血清内可能有自身抗体或同时存在不规则抗体。 红细胞血型检测 * 影响因素 ①离子干扰 ②温度 ③操作不规范 ④ 离心不当 红细胞血型检测 * 第二节 盐水介质实验技术 盐水介质试验技术常用于血型鉴定、血清中IgM类抗体的筛查和鉴定、盐水介质的交叉配血等。 基本方法 1.平板法 用于ABO血型和RhD抗原的定型 特点：简单、快速，但易污染环境。 2.试管法 为定型试验方法，也可于半定量试验。是输血 前检验最常用的试验方法。 特点：简单、快速、易学，结果准确、可靠。 3.微孔板法 为定性试验方法。 红细胞血型检测 * 盐水介质配血方法 患者 献血者 主侧 次侧 离心 看结果 阳性 阴性 红细胞血型检测 * 红细胞血型检测 * 第三节 酶处理实验技术 原理：在酶的作用下切断带有负电荷的羧基基团的唾液酸，降低Zeta电位，缩短红细胞之间的距离。增强IgG抗体对红细胞的凝集。 常用对的酶：木瓜蛋白酶，菠萝蛋白酶，无 花果蛋白酶等 红细胞血型检测 * 酶介质配血方法 患者 献血者 主侧 次侧 主次侧 均加酶 红细胞血型检测 * 37℃ 水浴30分钟 ? 37 ℃ 离心 看结果 阳性 阴性 ? 红细胞血型检测 * 结果的判断 （1）阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管凝集为阳性，不出现凝集判定为阴性。 （2）阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管凝集，实验失败分析原因，重新实验。 红细胞血型检测 * 第四节 抗球蛋白实验技术 基本原理 抗球蛋白试验（Coombs实验）主要用于检测血清中的不完全抗体如：IgG、IgA和（或）补体如：C3、C4。 在盐水介质中，不完全抗体只能致敏红细胞，而不能使红细胞出现可见的凝集反应，加入抗球蛋白试剂后，抗球蛋白分子的Fab片段与红细胞表面的受体结合，而产生红细胞凝集，因此采用此方法可以检测出血清中是否存在不完全抗体。 红细胞血型检测 * 抗球蛋白试验原理图 红细胞血型检测 * 分类及应用 抗球蛋白试验 直接 间接 致敏红细胞的不完全抗体、补体 血清中的不完全抗体 应用 直接：HDN的诊断、AIHADE的诊断、药物诱发型溶血病的诊断 间接：交叉配血及血型鉴定、器官移植、等 红细胞血型检测 * 抗球蛋白配血方法 患者 献血者 主侧 次侧 37 ℃ ? 37℃ 水浴30分钟 三洗 红细胞血型检测 * 加抗球蛋白 离心 看结果 阳性 阴性 红细胞血型检测 * 结果的判断 直接抗球蛋白试验： （1）阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管凝集，判定为阳性。 （2）阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管不凝集，须做阴性确认后判定结果。 （3）阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管凝集，结果不可信不能发出报告，分析原因后重做试验。 红细胞血型检测 * 间接抗球蛋白试验： （1）阳性对照管呈现凝集反应，阴性对照管不呈现凝集反应，被检管呈现凝集反应为阳性结果，表示被检者血 清中含有抗体。 （2）阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管出现凝集，实验失败，分析原因重做试验。 红细胞血型检测 * 第五节 聚凝胺介质实验技术 聚凝胺实验技术是一种快速、简便检测红细胞不完全抗体的方法，可用来检测IgG抗体，但IgG抗体的抗-K抗体除外。 一、实验原理 凝聚胺（polymatching）法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，