分子生物学实验文稿.pptVIP

基础分子生物学实验 主讲：赵 云 王茂林 助教：周云涛（博士生）李华鹏（博士生）高勇（硕士生） 实验技术人员：杨卫 2006.3 主要内容 微生物、动物基因组DNA的小量制备（项目1） 植物基因的克隆（包含项目1、2、3、4、6） Ⅰ植物基因组DNA的提取 ⅡTOC33基因片段的PCR扩增 主要内容 Ⅲ DNA的琼脂糖凝胶上回收与纯化 DNA片段的体外重组与转化 克隆的筛选与鉴定 分子杂交实验（选修） Southern blot Northern blot Western blot 安全第一！！！ Biosafety Overview What You Need to Know When Working With Biological Material Lab Etiquette 谦虚有礼 记住别人的帮助 有事预约时间 不随便移动实验室设备、资料，用后还原 未经许可，不用他人东西 公用试剂，用完前即准备新的 Lab Etiquette 发现设备破损或有安全隐患，及时处理或报告 坦承错误 不乱放自己东西，立即清理实验遗留 自己做自己的事 不在实验室作与实验无关的事 不与实验室以外的人讨论实验室的研究结果 室验报告撰写 好的实验报告就是一篇论文！ 背景 实验材料 实验方法 结果分析 讨论 参考文献 主要参考文献 林宏辉 赵云 王茂林 陈放。 现代生物学基础实验指导。四川大学出版社，成都，2002.8 颜子颖，王海林译，《精编分子生物学实验指南》，科学出版社，北京，1998。 魏群主编，《分子生物学实验指南》，高等教育出版社，北京，1999。 * * 序号 实验项目 内容简介 每组人数 实验时数 备注 1 基因组DNA的制备 细菌、动物、植物总DNA的提取；琼脂糖凝胶电泳 3 12 必修 2 质粒DNA 的制备 细菌质粒DNA的提取；限制性内切酶酶切；琼脂糖凝胶电泳，溴乙锭染色，紫外灯下检测，拍照 3 6 必修 3 DNA的重组 质粒载体与外源DNA片段的连接；大肠杆菌感受态细胞的制备；重组DNA分子导入原核细胞；重组子的鉴定 3 16 必修 4 细菌基因组文库的构建 基因组文库的构建；功能性筛选阳性克隆 3 8 必修 5 植物细胞mRNA的提取 ? 总RNA的提取；mRNA的分离、纯化与鉴定 3 8 选修 6 PCR基因扩增 特定基因片段的扩增；电泳检查 3 6 必修 7 分子杂交 植物基因组DNA的酶切、电泳，转膜与固定；探针的制备，预杂交，杂交，放射自显影 3 24 选修 实验项目的选择 注意事项 安全：- 要求：认真， 勤动，遵守实验室规章制度 实验室礼节： - 实验报告的撰写： - 首先，人身安全！ 其次，设备安全！ 最后，环境安全—生物安全！ - -