聚合酶链式反应(PCR)分析报告.pptVIP

Content of Table １　定义 ２　技术优点 ３　原理 ４　标准反应体系 ５　反应五要素 ６　热循环条件的选择 ７　反应特点 ８ 常见问题与对策 ９　污染 10 应用 1 定义 在引物指导下由酶催化的对特定克隆或基因组DNA序列进行的体外扩增反应。 2 技术优点 特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等 PCR product PCR反应曲线 4 标准反应体系 10×扩增缓冲液 10μl 4种dNTP混合物 各200μmol/L 引物 10～100 pmol 模板DNA 0.1～2μg Taq DNA聚合酶 2.5 u （Mg2+） 1.5 mmol/L 加双或三蒸水至 100ul 5 反应五要素 引物 （primer） 酶 （Taq DNA polymerase） dNTP （dATP,dGTP,dCTP,dTTP） 模板 （template） Mg2+ （magnesium） 5.1 引物 引物是PCR特异性反应的关键 PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA