DNA复制和RNA转录.ppt

DNA的复制和RNA的转录 §1 DNA生物合成的种类和方式 ? 中心法则的几个基本概念 §1.1.1 DNA复制的特点 半保留复制 半不连续复制 ? 半保留复制 以亲代DNA双链为模板，按照碱基互补方式合成子代DNA，这样新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式叫半保留复制 半保留复制的实验依据 半保留复制的实验依据 ? 两个起点，两个生长端的相向复制 DNA每条链有1个复制起点，分别合成1条新DNA，两条新链相向合成，每个生长点只有1条链合成，这种方式存在于线性DNA病毒 ? 1个起点，1个复制区的单向复制 DNA两条链的复制起始点在同一位置，复制向一个方向运动，两条DNA链均被复制，这种方式偶见于一些环形DNA的复制 ? 1个起点，两个复制区的双向复制 这种DNA复制方式最为普遍，复制起始于1个位点，形成两个复制区向相反方向运动，在每个复制区两条DNA链均被复制 ? 半不连续复制 DNA双螺旋的两条链是反向平行的，而合成方向只能是5‘?3’。所以在DNA复制时，1条链的合成方向和复制叉的前进方向相同，可连续复制，称为前导链；而另一条链的合成方向和复制叉的前进方向正好相反，不能连续复制，只能分成几个片段合成，称为滞后链。滞后链的片段叫作冈崎片段(~1000b)，它们合成后再连接起来 ?解旋：由拓扑异构酶解除DNA的超螺旋结构 ?解链：由解链酶使双链DNA解开再由单链结合 蛋白与单链结合，防止氢键再形成 ?识别起点：由DNA指导的RNA聚合酶即引物酶 完成 ?生成引物：以DNA为模板在引物酶催化下由 DNA转录成 ? DNA的生成：在RNA引物3?末端上按碱基互 补原则经DNA聚合酶III催化生成，其 3 ?末端与下一个RNA引物5 ?末端相连 ?切除引物：由DNA聚合酶I催化切除引物， 剩下的DNA片段即冈崎片段 ?补齐封口：DNA聚合酶I利用其DNA聚合酶 活性按碱基互补原则沿5 ?—3 ?方向填 补两个冈崎片段之间的缺口。其3 ? 末端羟基与下一个DNA片段5 ?末端 相连磷酸基，在DNA连结酶催化下 形成磷酸二酯键而被连结起来，最 终形成DNA模板链的完整新的互补 链，此部由NAD+供能 ?真核细胞与原核细胞DNA的复制区别 ? RNA引物和冈崎片段较小 ? 复制速度较慢，这可能与组蛋白的存在使DNA处于稳定的双股状态有关 ? 复制有多个起点 ? DNA聚合酶为α，β，γ以及线粒体聚合酶。它们仅能催化聚合作用，而没有原核细胞DNA聚合酶所有的外切酶作用 ? DNA片段的连结由ATP供能 RNA指导下的DNA复制(逆转录) ? 以RNA指导的DNA聚合酶催化合成DNA是以dNTP为原料及能源物质，以病毒单链RNA为模板，RNA为引物 反应时模板与引物以氢键相连，在引物3?羟基末端开始以5?—3?方向进行 DNA的聚合、延伸。合成的DNA以共价键相连，形成DNA-RNA杂合体。在DNA指导的DNA聚合酶催化下以杂合体中的DNA为模板合成一条DNA互补链，形成新的DNA分子 ? 逆转录酶是一种多功能酶 具有合成RNA、合成DNA、水解RNA的能力 RNA指导下的DNA复制(逆转录) §1.3 DNA复制的忠实性 ? DNA复制具有高度精确性，在大肠杆菌的细胞DNA复制中其错误率约为1/109～1/1010，即每109～1010个核苷酸才出现一个错误。这么高的精确性的保证主要与下列因素有关： ? DNA聚合酶的的自我校正 DNA 聚合酶不能从头合成DNA，即不能把两个dNTP连接起来，而只能将一个个核苷酸单位加