基因工程在农业育种中的应用 第三组:杨红 潘翠云 韩新宽 黄继旭 刘冬 一、基因工程概述 建立在植物分子遗传学与细胞生物学基础理论上的基因工程是通过基因导入与重组技术,将不同生物的遗传基因在体外进行分离、裁剪、组合与拼接,再通过载体转移到受体细胞内进行无性繁殖、稳定表达,从而改变受体原来的遗传性状,人工构建出新的作物品种。 二、基因操作的工具 1、 基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶 专一性: 识别特定核苷酸序列,在特定的切点切DNA,具特异性。并裂解磷酸二酯键,产生两个黏性末端。 例:大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别 GAATTC序列,并在G和A之间切开。 2、基因的“针线” ——DNA连接酶连接酶的作用: 将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。连接的部位: 生成磷酸二酯键DNA连接酶的作用过程: 连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接 起来,使之成为一个完整的DNA分子。 三、植物基因工程的基本模式、外源DNA导入方法与表达条件 植物基因工程的基本模式是先分离和制备目的基因,并将目的基因嵌入载体,获得重组DNA,然后将重组DNA导入受体植物细胞,使其稳定存在并能复制、转录和翻译。重组DNA还可经有性或无性方式传递给子代,达到按育种目标修饰和改造作物品种遗传性状的目的。 目的基因导入受体植物细胞中能否表达的关键,在于植物细胞的转录系统能不能识别目的基因所携带的转录信号——启动子顺序。研究结果表明,外源基因要先和载体结合,载体携带外源基因共同进入受体细胞内后,就会整合到受体植物的DNA上,由于植物转录系统能识别启动子的顺序信号,外源基因即可在受体植物细胞中得到表达。因此,基因工程的许多研究工作都围绕着寻找理想的载体而开展。目前最有希望作为目的基因载体物质的是根癌农杆菌Ti质粒。 四、基因工程培育优质、高产农作 物品种的进展 植物基因移植与导入技术的研究成功,为改变植物蛋白质、脂肪、淀粉与糖类的含量与品质,提高其营养价值,以及为改变蔬菜、果品的风味提供了可能与技术途径。世界各国应用基因工程进行农作物品质改良与优质、高产品种选育方面已取得了很大的进展。 3、我国东北师范大学的科研人员通过基因导入途径,将野生天兰冰草抗病、高蛋白基因的染色体片段,转移到小麦染色体行后再运用常规育种方法,选育出优质面包小麦新品种“小冰小麦33号”,经专家鉴定达到国际优质小麦标准。该品种蛋白质含量高达17%~18%,抗叶锈病、根腐病与黄矮病,产量达到4500kg/hm2~5000kg/hm2.。“小冰小麦33号“选育成功,填补了具有我国自主知识产权优质面包小麦品种的空白。 此外,我国专家还选育成功含油量比普通油菜品种提高25%的“超油1号”与“超油2号”油菜新品种,其中含油量高达52.8%的“超油2号”是世界上含油量最高的甘蓝型油菜品种。我国黑龙江农科院雷勃钧采用花粉管通道技术于1997年选育成功早熟、高蛋白、高油、大粒、耐盐碱的转基因大豆品种“黑生101”。 五、 基因工程培育抗病农产物品种的进展 日本烟草产业遗传育种研究所的专家,将黄瓜花叶病毒的随体脱氧核糖核酸植入烟草细胞,成功地培育出能抗花叶病毒的新植物体。日本专家采用的技术途径是先从黄瓜花叶病毒中提取脱氧核糖核酸,然后使用反转录酶制成脱氧核糖核酸,再把脱氧核糖核酸植入到烟草业细胞里。实验证明,给烟草接种上黄瓜花叶病毒后,依然生长发育良好,说明被接种的烟草已具备抗病毒的能力。 中国科学院微生物研究所将TMV和黄瓜花叶病毒CMV的CP外壳蛋白基因拼接在一起,构建了“双价”抗病基因,转入烟草后获得了同时抵抗两种病毒基因的植株。在田间实验中,对TMV的防治效果为100%,对CMV的防治效果为70%左右,可使烟草产值增加10%~30%。目前,我国专家还通过CP 途径进行小麦抗黄萎病、水稻抗矮缩病、棉花抗枯、黄萎病等基因工程的研究,并已取得进展。 中国科学院植物研究所的科研人员,采用花粉通道法和基因枪法将大麦黄矮病毒CPV株系外壳蛋白基因导入小麦栽培品种中,在世界上首次获得抗大麦黄矮病毒CPV株系转基因T0代及其后代T1、T2、T3代。 中国农科院作物所共同合作,综合应用生物技术和常规育种相结合的方法,将黄矮病抗性基因从中间偃麦草导入普通小麦,在国际上首次成功地育成一批抗黄矮病普通小麦新品系,创造了抗黄矮病普通小麦新种质,为小麦育种家提供了优异抗黄矮病的亲本资源。 此外,我国在番茄转基因抗病育种方面也创造了许多抗病基因类型,如北京大学育成抗病毒番茄品种;国家基因工程中心选育成功高抗TMV、CMV、马铃薯X病毒和抗早疫病、晚疫病两种真菌病害的多抗
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