①限制性核酸内切酶第一个字母.pptVIP

同尾酶是指来源各异、识别序列不同，但产生相同的黏性末端的II限制性核酸内切酶。 如： BamHI (5’-G↓GATCC-3’ ) Bgl II (5’-A↓GATCT-3’) 3、II型限制性核酸内功酶不具有甲基化功能 如 EcoRI限制性核酸内切酶与 EcoRI甲基化酶，两者均识别GAATTC序列，而前者能对G↓AATTC序列进行切割，后者的作用是使第二个A甲基化。目前已经分离到许多II型限制性核酸内切酶与其对应的甲基化酶。 4、II型限制性核酸内切酶对单链DNA的切割 有一些II限制性核酸内切酶，除双链DNA外，还可以特异识别并切割单链DNA的相应位点，只是切割效率比较低。如Hha I能切割单链噬菌体ФX174和 M13mp18 DNA，只是切割单链 DNA比切割双链 DNA效率低50％。 五、Ⅱ限制性核酸内切酶的主要用途 ①产生具有相同粘性末端的DNA片段，以便重组克隆； ②建立DNA分子的限制酶图谱； ③构建基因文库； ④构建载体。 六、II型限制性核酸内切酶的酶切反应 1、标准酶解体系的建立 反应体积一般为20μl(根据DNA量可适当扩大)。 ① 10×酶切缓冲液 2μl(大部分酶反应缓冲液基本相似