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- 2016-11-22 发布于湖北
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回顾转基因的整个实验操作流程 参考论文:《农杆菌介导的LFY基因过量表达载体转化百合的研究》 — 华农 中国是百合种类分布最多的国家,百合开花时间上,不同品种差异较大,大多数品种从种子到开花需要2-3年。过长的营养生长阶段己经成为其商业生产的阻碍,且传统的日照,温度等花期调控手段存在费时费力,效果不显著的现象。拟南芥LFY基因参与花分生组织和花器官起始以及花序形态构成。但是LFY基因对于植物由营养生长向生殖生长转化的作用在百合中还未见报道。 研究意义 基本流程 基于以上研究结果我们构建了拟南芥组成型启动子CaMV35S启动的LFY基因过量表达载体,并通过农杆菌介导法转化到百合中。通过潮霉素抗性筛选,PCR检测获得了转化植株,并研究了 基因对其形态发育过程的影响进行了观测统计和数据分析,以期为百合形态和花期调控进一步研究打下基础。 LFY基因的克隆 在已报道的LFY序列基础上以拟南芥cDNA 为模板,设计特异引物扩增1200bp的LFYcDNA全长序列,引物序列如下: LFY-F:AGATCTTATGGATCCTGAAGGTTTCACGAGTG (下划线为 Bgl //限制性内切酶位点) LFY-R: GGTGACCCTAGAAACGCAAGTCGTCGCCGC (下划线为Bst EⅡ限制性内切酶位点)。 1.1 PC
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