第章发酵工程概述.ppt

3.青霉素工艺流程 冷冻管 斜面母瓶 大米孢子 一级种子罐 二级种子罐 发酵罐 放罐 提炼 种子制备：以生产丰富的孢子或大量健壮的菌丝体为目的。 发酵培养：环境因素；生理变量因素 发酵后处理：过滤；提炼；脱色；结晶。 二 氨基酸发酵生产 棒状杆菌属 短杆菌属 小杆菌属 节杆菌属 1 谷氨酸发酵生产的菌种 细菌 2 谷氨酸发酵生产的原料制备：淀粉水解糖 淀粉 葡萄糖 葡萄糖 淀粉 水 水解25min 蒸汽 80℃ NaOH pH：4.0-5.0 酶解 酸解 脱色 过滤 淀粉水解糖 淀粉乳 pH 1.5左右 HCl 3 菌种扩大培养 34-37℃ pH:7.2-7.4 放罐 一级种子培养和二级种子培养 ； 发酵初期 菌体生长期 产酸期 4 谷氨酸发酵生产 2-4h pH:7.5-8.0 30-32℃ 5．谷氨酸提取 发酵液 pH 3.22（谷氨酸等电点） 谷氨酸结晶 HCl 析出 含谷氨酸的发酵液 离子交换法 谷氨酸 二次提纯 一次提纯 方法：等电点－离子交换法 基因工程 酶工程 细胞工程 发酵工程 产物 产品 产品 实验室阶段：不用种子罐，所用的设备为培养箱、摇床等 实验室常见设备。 生产车间阶段：种子培养在种子罐里面进行。 3.发酵 X S（底物） ─→ X（菌体） ＋ P（产物） 发酵研究的内容： 菌种的来源——找到一个好的菌种 发酵过程的工艺控制——最大限度发挥菌种的潜力 4. 下游处理 发酵液预处理和固液分离 提取 精制 成品加工 第三节 液体深层发酵 一 发酵的操作方式 分批发酵、连续发酵、补料分批发酵 1 分批发酵 营养物和菌种一次加入进行培养，直到结束放罐，中间除了空气进入和尾气排除，与外部没有物料交换。 第三节 液体深层发酵 分批发酵工艺流程图 第三节 液体深层发酵 微生物分批培养的生长曲线 1.延滞期；2.加速生长期；3.指数生长期；4.减速期；5.稳定期；6.衰亡期 优点: 操作简单，周期短，染菌机会少，生产过程和产品质量容易掌握 缺点: 产率低，不适于测定动力学数据 2 连续发酵 反应器 搅拌罐式反应器 管式反应器 是指以一定的速度向发酵灌内添加新鲜培养基，同时以相同速度流出培养液，从而使发酵灌内的液量维持恒定。 一 发酵的操作方式 第三节 液体深层发酵 单罐连续发酵 多罐串联连续发酵 管式连续发酵 连续发酵的优点是： ①稳态操作，使产品的产率和质量保持稳定； ②更有效地实现机械化和自动化； ③减少设备清洗、准备和灭菌等非生产占用的时间； ④测量仪器由于减少灭菌次数而延长寿命； ⑤容易对过程进行优化，提高发酵产率。 连续发酵的缺点： ①由于是开放系统，发酵周期长，容易造成杂菌污染； ②微生物易发生变异； ③对设备、仪器的技术要求较高； ④黏性丝状菌菌体容易附着在器壁上及在发酵液中结团。 连续发酵主要应用于研究，很少用于工业生产。 3 补料分批发酵 补料分批发酵 在微生物分批发酵中，以某种方式向培养系统补加一定物料的培养技术。 单一补料分批发酵 反复补料分批发酵。 发酵过程工艺控制的目的: 创造一个适合菌种生长的最佳条件，使菌种的潜能发挥出来；从而使目标产品得到最大的比生产速率和最大的生产率。 二 发酵工艺控制 糖代谢产生的中间物 合成菌体的前体 合成产物的前体 合成副产物 环境 环境 环境 直接参数:温度、 pH、溶解氧浓度、压力、发酵液粘度等； 间接参数:细胞生长速率、产物合成速率和呼吸熵等。 发酵过程变化的参数 从检测手段分可分为：直接参数、间接参数 (1) 温度对生长的影响 根据微生物对温度的要求大致可分为四类： 1 温度 在最适温度下，微生物生长迅速； 超过最高温度微生物即受到抑制或死亡； 在最低温度范围内微生物尚能生长，但生长速度非常缓慢，世代时间无限延长。 在最低和最高温度之间，微生物的生长速率随温度升高而增加，超过最适温度后，随温度升高，生长速率下降，最后停止生长，引起死亡。 (2) 温度对发酵过程的影响： ①温度影响反应速率； ②影响菌体代谢产物的合成方向； ③影响发酵液的理化性质等。 调节：向发酵灌的夹套或蛇形管中通入冷水、热水或蒸汽 2 pH pH对发酵过程的影响： ①影响酶的活性； ②影响细胞膜的通透性； ③影响培养基组份及中间代谢产物的解离； ④影响菌体代谢过程的变化 pH是微生物代谢的综合反映，又影响代谢的进行，所以是十分重要的参数。 例如黑曲霉在pH2~