转基因动物生物技术分析.pptVIP

转基因动物技术 目 录 概述 1976年Jaenisch等获得含有SV40 DNA的嵌合体小鼠。 1980年，Gordon应用显微注射法首次成功地将重组的外源DNA直接注入小鼠受精卵雄原核中，获得了携带外源基因小鼠。 1982，Palmiter将大鼠的生长激素基因用微注射方法导入小鼠的受精卵中获得巨型小鼠（supermouse），从而在理论上和实践意义上都将转基因技术提高一步，引起生物学界极大的关注，为基因工程育种提供诱人的前景。 早期以提高生长为主到现在的以生产药用蛋白和可移植的器官 转基因技术 转基因技术：是把已知 基因转移到真核细胞，并整 合到基因组中得到稳定表达 的技术。它是改变物种遗传 性状的最根本途径。 转基因动物 转基因动物：是指 基因组中整合有外源基 因的一类动物。整合到 动物基因组上的外源结 构基因称为转基因。 转基因动物技术 转基因动物技术：是将外源 基因或体外重组的基因结构转移 到动物的受精卵内，使其在动物 体内得到整合和表达，以产生具 有新遗传特征或性状的动物，并 能将新的遗传信息稳定地遗传给 后代，获得外源基因系或转基因 群，或者是外源基因在特定调控 元件的作用下在某些宿主组织中 进行独立的复制，并在一定时间 内表达外源蛋白（生物反应器）。 制备转基因动物的基本流程 1、目的基因克隆和体外重组 1）人工合成 2）互补DNA（cDNA）的克隆 3）DNA克隆 2、外源基因的导入 将目的基因转入→培养→产下后代 3、外源DNA整合、转录及表达的分子检测 是否是转基因动物 转基因的导入方法 显微注射法 ? 显微注射法是通过显微操作仪将外源基因直接注射到受精卵的原核中，该法是产生最早且又最为有效的转基因方法 。 ?但原核显微注射法技术难度比较大，不仅需要昂贵的仪器，而且需要一定的操作技巧。 显微注射法 显微注射法基本流程 逆转录病毒感染胚胎法 将外源基因重组到DNA病毒或RNA病毒上，再用重组的DNA病毒或RNA病毒去感染着床前后的胚胎，随后病毒基因插入到宿主胚胎基因组中，外源基因也自然整合到胚胎基因组中。 逆转录病毒感染胚胎法是近年来兴起的基因转移方法，操作相对简单而且感染后基因的整合效率高。 胚胎干细胞法 胚胎发育卵泡阶段的细胞能在培养基中体外增殖，当把他们重新输回胚胎胚泡后，仍保留着分化成其他细胞（包括生殖细胞）的能力，这些细胞称为多效性胚胎干细胞（ES）。 ES在体外培养时可承受转基因操作而不影响其分化多效性，外源基因通过同源重组方式特异性整合在ES基因组内的一个非必需位点上，构成工程化胚胎干细胞，工程化胚胎干细胞经筛选鉴定和体外扩增，再输回小鼠胚胎胚泡中，最终形成转基因动物。 胚胎干细胞法 精子载体法 精子载体法是精子和 外源DNA混合培养时，外 源DNA可直接进入精子的 头部，通过受精将外源基 因引入动物细胞中。 外源DNA导入精细胞 的方法有DNA与精子共育 法、点穿孔导入法、脂质 体转染法。 精子载体法 细胞核移植法 　 细胞核移植技术，就是将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中，使后者不经过精子穿透等有性过程即无性繁殖即可被激活、分裂并发育成新个体，使得核供体的基因得到完全复制。以供体核的来源不同可分为胚细胞核移植与体细胞核移植两种。 细胞核移植法 生殖细胞转染法 转基因动物技术应用前景 自20世纪80年代第一只转基因小鼠诞生起，人类就开始了对转基因动物的研究。随着研究的不断深入和实验技术的不断完善，有些转基因动物的成果已进入实用化和商业化的开发阶段。目前，转基因动物主要应用于医药、食品、生产等各个方面。 在医学上的应用 1.人类疾病动物模型 建立用于药物研究的适合基因治疗的转基因动物模型是转基因动物的重要方向。 此模型具有准确、经济、试验次数少、显著缩短试验时间等优点。 2、异体器官移植 器官移植是目前治疗器官功能衰竭等疾病的首选技术，为患者带来希望，利用转基因动物可以在动物体上培育人体器官，有效缓解器官供需日益突出的矛盾。 在生产中的应用 1、促进动物生长，提高生产性能 利用动物转基因技术可以促进动物的生长发育，提高动物的生产性能。通过导入外源性生长激素基因，改造动物原有的基因组，从而达到加快动物生长速度，提高肉、蛋、奶等