细胞生长调节因子与组织制剂详解.pptVIP

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细胞生长调节因子与组织制剂 第一节 细胞生长调节因子的概述 一、细胞生长调节因子的概念 细胞生长调节因子系在体内和体外对效应细胞的生长、增殖和分化起调控作用的一类物质。 细胞生长因子常称为生长因子 因此以细胞生长调节因子来表达广义的细胞生长因子。 二、细胞因子的共同特性 绝大多数细胞因子是低分子量(15~30kD)的蛋白或糖蛋白。 细胞因子可以旁分泌、自分泌或内分泌的方式发挥作用。 一种细胞可产生多种细胞因子,不同类型的细胞也可产生一种或几种相同的细胞因子。 细胞因子的分类 细胞生长刺激因子类 白细胞介素 促红细胞生长因子 等 细胞生长抑制因子 干扰素 肿瘤坏死因子等 二、细胞生长调节因子的一般制备方法与活性测定 制备方法 细胞生长调节因子以提取方法制备得量很低,主要是通过组织(细胞)培养获得。 制备中应特别注意以下几点: 生产中必须保证生产条件的一致性,以免影响质量。 严格的纯化手段,以去除可能引起安全性问题的污染物 。 在外来宿主中表达的天然的基因编码的细胞因子,其结构、生物学或免疫学性质可能与天然的细胞因子不同。 生长程序中可能带来有害的中间产物,如内毒素、表达产物中潜在的致癌性DNA。 制定生产规程应详尽介绍细胞系、添加物(如诱生剂)、增强对或其他物质(如抗生素)等的特性。 二、测定方法 放射免疫法直接测定 其活性和细胞生物学作用机制方面的研究仍采用细胞培养测定活性。 测定中注意以下几点: 必须根据因子的作用特性,掌握其生长需求条件,排除细胞代谢产物的影响。 选择适宜的细胞培养系统和敏感的靶细胞。 作用效应指标的选择。 必须采取特异性生物学试验来评价其活性。 应测定比活性,并有高纯度的参照品。 三、重要的细胞生长因 子 人促红细胞生成素(hEPO) 由肾脏和肝脏分泌的一种激素样物质,能够促进红细胞生成。 增加血液中红细胞百分比 结构和性质及工艺 由166个或基酸残基组成的糖蛋白激素。其分子量为21.3KD,水解并除去27个疏水氨基酸肽段后得到分子量18.4KD的激素。 检验 生化测定法: SDS测蛋白 生物活性测定 放射性Fe法 第二节 组织制剂 组织制剂系指采用动物的组织、器官、腺体等提取得到的具有生理作用的混合制剂。 制剂所含成分未经纯化成单一组分(混合物) 常常含有多肽、激素、核梭类物质、多糖及少量蛋白质等多种成分,组成较为复杂。 组织制剂的一般制备方法 (1)粉碎 (2)提取 (3)依据蛋白质的特点,采用适当的分离手段如等电点沉淀、盐析、有机溶剂沉淀、吸咐、离子交换、超滤等除去非有效成分,特别是异种蛋白。 (4)浓缩或干燥成半成品 (5)制剂 三、组织制剂的生理活性和临床应用 传统的中医中药结合现代提取、分离手段,则形成为当今的动物组织提取制剂,在临床应用中占有一席之地。 * * 细胞生长调节因子 正性细胞生长因子 负性细胞生长因子 * * * * * 天然的细胞因子由抗原、丝裂原或其他刺激物活化的细胞分泌。

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