气相要点解读.pptxVIP

气相色谱基础;一、色谱原理及基本理论1.色谱原理;样品组分分离示意图;2.基本理论:;（1）塔板理论：;塔板理论假定： （1）在色谱柱内一小段长度H内，组分可以在两相中瞬间达到分配平衡。 （2）流动相进入 色谱柱不是连续的，而是间歇式的，每次进入一个塔板体积。 （3）试样和新鲜流动相都加在第0号塔板上，且试样的纵向扩散可以忽略。 （4）分配系数在各塔板上是常数。 理论塔板数N可以从色谱图中溶质色谱峰的有关参数计算，常用的计算公式有以下两式： tR tR N=16(————)2 N =5.54 (————)2 W W1/2 式中：W1/2为半峰宽；W为峰底宽（经过色谱峰的拐点所作三角形的底边宽）。 　　理论塔高度H与理论塔板数N和柱长的关系如下： L H=———— N ;（2）速率理论;①涡流扩散（不同路径的影响）;②纵向扩散;③传质阻抗;由以上的讨论可以看出，色谱柱填充的均匀程度、载体的粒度、载气的流速和种类、固定液的液膜厚度和柱温等因素都对柱效能产生直接的影响。其中许多因素是互相矛盾、互相制约的，如增加载气流速，分子扩散项的影响减小，但是传质阻抗项的影响却增加了；柱温升高有利于减少传质阻抗项，但是又加剧了分子扩散。因此应全面考虑这些因素的影响，选择适宜的色谱操作条件，才能达到预期的分离效果。 ;二、气相色谱系统;㈠载气系统;载气及其净化 除去水分，可用吸附剂硅胶和分子筛净化；除去烃类化合物，可用活性炭净化。 载气流速的控制 通常使用减压阀、稳压阀、针形阀、稳流阀等来控制气流的稳定性。 载气流速的测量 常用转子流量计、皂膜流速计、电子气路控制（EPC）系统三种方法来测量流速。 ;㈡进样系统;气化室 气化室的作用，是将液体样品瞬间气化为蒸气。气化室实际上是一个加热器。 由于毛细管柱样品容量在纳升级，直接导入如此微量样品很困难，通常采用分流进样器。进入气化室的载气与样品混合后只有一小部分进入毛细管柱，大部分从分流气出口排出，分流比可通过调节分流气出口流量来确定 。 主要介绍分流/不分流气化室的结构示意图。;分流进样;分流进样规则： 进样口温度比样品中最高沸点的温度至少高20?C，以便高效且得到好的重现性。 针头不用预热，快速进样，并迅速拔出针头。自动进样器一般为1μL或更少。对高沸点的样品应在进样口停留1-2s. 如果程序升温，柱温箱的温度应该高于溶剂的沸点，进样后应快速升温。 以确保隔垫吹扫打开，设定为2-5 mL/min. 分流比：分流流量与柱流量的比值。 载气总流量=柱流量+分流流量+隔垫吹扫流量（如：总流量54ml/min，柱流量为1 ml/min，吹扫流量为3ml/min，分流比为50:1，则分流流量为50 ml/min） ;不分流进样（一种瞬间不分流与大部分时间分流相结合）; 不分流进样规则： 将软件置于不分流模式（splitless）。所有进样口的流量应经过色谱柱和隔垫吹扫. 将进样口温度设置为沸点最高物质的沸点上。 在进样口预热针头0.05 min. 以1.0 μL/sec的速度进样。让注射器停在进样口几秒钟以确保样品完全气化。 开始时，柱温箱温度设定为比溶剂的沸点低20oC，保持1分钟，然后以30oC/min的速度升到比溶剂沸点高 40-60oC的温度，然后再根据样品需要程序升温。 进样时间为0.5-1.0分钟后，进样口切换到分流模式。排气流量至少应设为50 mL/min. 保证隔垫吹扫打开，并设为2-5 mL/min. ;进样注意的问题： （1）手不要拿注射器的针头和有样品部位、不要有气泡（吸样时要慢、快速排出再慢吸，反复几次，10ul注射器 金属针头部分体积0.6ul，有气泡也看不到，多吸1-2ul把注射器针尖朝上气泡上走到顶部再推动针杆排除气泡，进样速度要快（但不易特快），每次进样保持相同速度，针尖到汽化室中部开始注射样品。 （2）注射器用一段时间就会发现针管内靠近顶部有一小段黑的东西，这时吸样注