猪轮状病毒感染研究进展重点解读.doc

猪轮状病毒感染研究进展 丁玉春1 魏文栋2 郑缨2 (1、重庆市种猪场,重庆 荣昌 402460 2、重庆市畜牧科学院,重庆 荣昌 402460 ) 猪轮状病毒感染是由猪轮状病毒（Porcine Rotavirus，RV)引起的一种传染病，也称胃肠炎。此病多发于仔猪。主要表现为厌食、呕吐、腹泻、脱水等症状。育成猪和成年猪通常为隐性感染[1～2]Woode和Bridge1975年首次从猪中分离出轮状病毒，目前本病已广泛分布于五大洲,并引起严重经济损失[3]。以英国为例，1～4周龄仔猪群发病率超过80%，死亡率7%～20%[4]。我国兽医工作者也从仔猪的腹泻粪便中检出RV。 1 病原学 猪轮状病毒（RV）属于呼肠弧病毒科轮状病毒属的A、B、C、E 群[4]。成熟完整的病毒粒子略呈圆形，没有囊膜，具有双层表壳，直径为65～75nm的二十面体对称。电镜观察，病毒的中央为一个电子致密的六角形棱心，直径37～40nm，即芯髓；周围有一电子透明层，壳粒由此向外呈辐射状排列，构成中间层衣壳；外周为一层光滑薄膜构成的外层衣壳，厚约20nm，形成一个轮状结构，RV由此而得名[5]。在感染的粪样和细胞培养物中均存在两种形式的病毒粒子：具有双层表壳的光滑型（S型）双层颗粒，有感染性，直径为75nm；没有外表壳的粗糙型（R型）单壳颗粒，无感染性，直径为65nm。 有关RV的超微结构，学者们的意见尚不一致，Martin等（1975年）认为RV与环状病毒一样，也有32个大的环形壳粒，且其180个三联亚单位按T=9的、方式组成20个三角面体。每个三联亚单位包含3个结构单位，所以一共有540个结构单位。但据Esparza（1978年）报道，RV表面有162个孔，由320个三联亚单位按T=9方式组成20个三角面体。因每个三联亚单位包含三个结构单位，所以一共有960个结构单位。出现上述不同的观察结果，也许是标本制作方法不同的缘故。Stannard氏等（1977年）对乳鼠流行性腹泻轮状病毒和猴RVSA11株进行了细致的电子显微镜观察，发现其内衣壳有180个形态亚单位，排列成晶格状。12个顶各为一个空隙，由5个壳粒围绕，另外80个空隙各由6个壳粒围绕。外衣壳由蜂窝样的晶格组成，且与内衣壳的晶格排列相符[4]。 1.1 分子生物学特性 通过X-射线晶体结构研究发现，完整的病毒粒子具有复杂的结构。最外层核衣壳由结构蛋白VP7和VP4组成，中间层衣壳由VP6组成，最内层衣壳由VP2和少量的VP1、VP3组成。VP7是构成外衣壳最丰富的外壳蛋白，是分子量为37KD的糖蛋白。VP4是88KD的红血球凝集素纤突蛋白，沿VP7形成的光滑表面向外突出。不完整的病毒粒子是完整的病毒粒子在进入被感染细胞过程当中外衣壳蛋白VP4和VP7被溶解掉而形成的两层核衣壳结构（DLP）。除了VP4、VP7、VP6、VP2、VP1和VP3这6种结构蛋白以外，还有5种非结构蛋白，分别是NSPl、NSP2、NSP3、NSP4和NSP5[6]。 病毒的基因组由11个独立片段的双股正链RNA组成。除了片段11具有两个开放阅读框（0RD）外，其他的片段只有1个ORF。在各个ORF的5’端和3’端都有非编码区（UTRs )，不同毒株的UTRs高度保守，而ORF的差异比较大。轮状病毒的mRNA分子具有5’端m7GpppGn帽子结构，而3’没有Poly（A）尾。ORF的基因编码结构蛋白和非结构蛋白，两端的UTRs可能与调节蛋白的结合以及核酸的复制、表达有关[6]。 早期的研究结果认为VP7与病毒的附着有关，但现在越来越多的证据表明VP7具有稳定VP4结构的作用。在病毒侵入细胞的过程当中VP4起到关键作用。VP4能被胰蛋白酶(Trypsin) 分解为VP5(60KD) 和VP8(26KD) 两个结构部分，与病毒附着、聚集有重要关系， 可以数倍提高轮状病毒的感染性[7]。VP5含有一个与有膜病毒如流感病毒类似的区域，它能增加细胞膜的渗透性，加强病毒进入细胞的能力。VP8含有唾液酸附着（Sialic acid binding）的区域，这一区域对于需要硅酸进行感染的轮状病毒亚单位来说至关重要。VP6与内衣壳蛋白VP1和VP3的转录活性有关[8]。VP4和VP7被溶解掉之后，VP1和VP3的转录酶活性被激活，转录产物被合成和排出。最内层的病毒粒子衣壳由包裹基因组的VP2、VP1、VP3组成，基因组核酸通过VP1、VP3与VP2紧密相连。VP1和VP3具有RNA转录酶和修饰酶的潜在活性。 非结构蛋白NSP1、NSP2、NSP3、NSP5都是RNA结合蛋白，与病毒的复制，合成和表达有关。NSP5可与VP2作用，进而影响VP1/2/3的核心结构，同时也能影响VP6的稳定性。而NSP4是一种糖蛋白，与