正交试验优选红景天多糖的提取工艺重点解读.docxVIP

正交试验优选红景天多糖的提取工艺 摘 要:本实验研究了红景天粗多糖提取过程中不同条件对粗多糖提取率的影响, 采用正交试验方法，采用EXCEL直观分析及方差分析和SPSS方差分析处理，对提取过程的工艺条件进行优化, 确定最佳工艺为 15倍水,提取 3次, 每次 1 . 5 h , 乙醇浓度 80 % 。并通过实验验证, 确保所得提取工艺稳定可靠。 关 键 词: 红景天; 多糖; 正交设计法 红景天含有大量红景天多糖 ( RSP ) 。红景天多糖具有抗疲劳、 抗寒、 抗衰老、 抗微波辐射、耐缺氧、抑制肿瘤、调节血糖等多种功能, 具有极高的药用和保健 价值, 成为近年 研究开发的热点。本实验采用正交试验对红景天粗多糖的提取工艺进行优选, 用苯酚—硫酸比色法测定其含量, 以寻求合理的提取工艺。 正交实验设计 采用水提醇沉法提取红景天粗多糖, 称取 9 份红景天粉末, 每份 50 g 。按照正交设计方案提取, 经醇沉后 6 0℃ 干燥, 得红景天粗多糖提取物, 称重。影响多糖提取的 4 个主要因素: 提取次数、 提取时间、 乙醇浓度和加水量, 每个因素选择三个水平, 按照 L9 ( 34)正交表设计安排实验 。 表头设计 将A、B、C、D四因素分别放入第1、2、3、4列中，进行试验方案设计。 因素数　 列 号　　12344ABCDEXCEL直观分析（极差分析）过程 试验号A（固液比w/v）B（提取次数）C（乙醇浓度%）D（提取时间h）粗多糖量%实验方案111113.91 A1B1C1D12122213.45 A1B2C2D23133311.86 A1B3C3D3421238.06 A2B1C2D35223110.21 A2B2C3D16231213.91 A2B3C1D2731326.31 A3B1C3D28321312.14 A3B2C1D39332110.54 A3B3C2D11.明确实验方案，得出实验结果 注：表中粗多糖量指按照上述实验方案进行，所测得的红景天中粗多糖的含量。 2.计算K、k值及极差，并确定因素主次 K：利用内置函数SUMIF()计算。 k：ki=Ki/S，其中S为任一列上该水平出现的次数。 R： 3.优方案的确定 由图表可知，ABCD因素主次为B（提取次数）D（提取时间h）C（乙醇浓度%）A（固液比w/v），在不考虑各因素交互作用的前提下，优方案应取各因素最大k值所对应的水平，因此可选择的优方案为A2B3C2D2 .即提取固液比为1:15，乙醇浓度为80%，提取次数为3次，提取时间为1.5小时每次。 4.各因素趋势图 5.进行验证实验 由于由正交试验直观分析得到的最优方案为A2B3C2D2，为保证选择优方案的正确性，可将A2B3C2D2做一遍，即提取固液比为1:15，乙醇浓度为80%，提取次数为3，提取时间为1.5h每次，记录得到的试验结果。并且将结果与之前已做试验对比，验证最终最优提取方案。 EXCEL方差分析过程 由于本试验正交设计中没有空列，不能进行方差分析。综合考虑试验情况，极差最小的因素对实验结果影响最小，因此选择把极差R最小的因素看做空列项，即将因素固液比看做误差进行方差分析（α=0.05），如下表。 试验号空列B提取次数C乙醇浓度D提取时间粗多糖量%111113.91 2122213.45 3133311.86 421238.06 5223110.21 6231213.91 731326.31 8321312.14 9332110.54 K129.220 18.280 29.960 24.660 　K232.180 35.800 32.050 33.670 　K328.990 36.310 28.380 32.060 　计算离差平方和  = 1 \* GB3 ①总离差平方和SST  = 2 \* GB3 ②各因素引起的离差平方和 计算自由度 计算均方 计算F值，显著性检验 方差分析表 　　　　　差异源SSdfMSF显著性B70.25460 235.12730 33.29497 *C2.25927 21.12963 1.07071 　D15.39247 27.69623 7.29478 　误差e2.11007 21.0