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AtheNA Multi-Lyte 抗核抗体检测系统性能—— 一种均相的多元微珠抗核抗体检测系统 M. Kopnitsky, M. Connelly, D. Ryan, K. Cichonski, J. Torres, G. Lin, J. Hablawai, M. Desiderio 宙斯科技公司（Zeus Scientific, Inc.,） Raritan, NJ 08869 我们进行了一项临床研究，目的是评价一种已商业化的试剂盒，该产品是基于流式细胞计数原理的微珠系统，能同时检测14种不同的抗核抗体（ANA）。重组的或亲和层析纯化的蛋白质（SSA, SSB, Sm, RNP C, RNP 68, RNP A, snRNP BB’, Scl-70, Jo-1, PM-Scl, Centromere B, dsDNA 和 histones）通过共价键结合于可识别的聚苯乙烯微珠表面。这些抗原特异性的微珠混和在一起组成了多元的抗核抗体底物。通过这一均相的系统可以从患者血清同时检测14种不同的抗体。 本研究选用了1210例血清标本，其中358例为献血者血清，478例为常规检测的ANA标本，374例为自身免疫患者的血清标本。参考方法包括ANA HEp-2 IFA和 单个标志物的ELISA法检测试剂盒(包括SSA, SSB, Sm, Sm/RNP, Scl-70, Jo-1, dsDNA 和Histones)。 与ANA HEp-2法相比，符合率为78.2%（906/1159），其中结果不符合的标本用ELISA法试剂盒再测试后，符合率达到91.9%（1051/1144）。实验表明，AtheNA Multi-Lyte抗核抗体检测系统提供了一种简便而均相的、多元而客观的方法，灵敏度及特异性与ANA Hep-2 IFA方法和常规的ELISA方法有着较好的可比性。 很多自身免疫性疾病都可以用特异性的抗核抗体（ANA）来描述，因此检测特异性的抗核抗体可以帮助临床上的诊断，有时侯也用来监控疾病的进程。大多数自身免疫疾病可以分为两类：非器官特异性的（或系统性的）和器官特异性的。 系统性的自身免疫疾病，往往会在多个器官上发生组织损害和炎症，与抗原结构无关，通常因为免疫复合物循环的组织沉积而发生。这些免疫复合物由对可溶性的核酸细胞抗原或较少见的细胞质源应答的自身抗体组成。一些更常见的系统性自身免疫疾病包括系统性红斑狼疮（SLE），类风湿性关节炎，硬皮症（和CREST），多肌炎，混合型结缔组织疾病（MCTD），药物诱导的SLE和Sjǒgren’s综合症。 器官特异性的自身免疫性疾病则是局部损伤、炎症、及由自身抗体引起的或对抗位于特定细胞、组织、器官上的靶抗原而引起的功能紊乱。这些都有大量的例子足以证明。比较常见的例子包括：血管的（抗磷脂综合症，脉管炎如Wegener’s肉芽肿病）、皮肤的（Raynaud’s现象，普通天庖疮）、胃肠道系统的（肠炎）和内分泌腺体的（Grave’s 疾病，Hashimoto’s甲状腺炎）。 AtheNA Multi-Lyte ANA检测系统即用于辅助诊断各种系统性自身免疫性疾病的产品。 AtheNA Multi-Lyte ANA 检测系统. 使AtheNA Multi-Lyte ANA检测系统能够实现的技术平台是Luminex设备。Luminex设备（LabMAP 100）之前已详细介绍过了（1）。简而言之，Luminex由流式细胞计数器、5.6(m聚苯乙烯微粒和一台能做实时数据分析的数字信号处理器组成。相同大小的微粒用不同的染料染色，形成100种可识别的特殊微粒。这些微粒在ANA免疫分析时起到固相的作用。 AtheNA Multi-Lyte ANA系统是一种均相的微珠免疫分析系统，可对抗核抗体做定性和半定量的分析。该系统能对与主要自身免疫性疾病相关的自身抗体各标志物做检测。 本系统在设计时已考虑到不需做特异性较低的ANA HEp-2 IFA或 ANA ELISA筛选试验，因为所有特异性的自身抗体的检测都已经包括在同一实验中了。 宙斯公司选用了一组天然或重组的自身抗原使之成为一个多元体系，能对这些特异性的抗体同时做半定量检测，包括SSA, SSB, Sm, U snRNP B/B’, U1 snRNP 68, U1 snRNP A, U1 snRNP C, Scl-70, Jo-1, PM-Scl, Centromere B, dsDNA, histone H 和 histone HLY。另外，在微珠混合物中还包含了一些表面结合有牛血清白蛋白（BSA）的微珠，以监控非特异性抗体的结合。 首先在不同微珠表面通过共价键结合特异性的蛋白并混匀形成一个多元体系。在检测时，先将血清标本用稀释液以1：200倍数稀释，然后取10??