基因克隆载体质粒概述.ppt

基因克隆载体 生物与食品工程学院 载体的概念 克隆载体是一种能携带外源DNA片段进入受体细胞，并在受体细胞中得以维持或表达的DNA分子。 生物学本质：质粒、噬菌体、动植物病毒改造后的产物。 特 点：能在受体细胞内稳定存在和复制。 载体的一般特征 1. 容易进入受体细胞 2. 自主复制功能 3. 显著的筛选标记 4. 特定的多克隆位点 5. 安全性 载体的种类 1. 质粒载体 2. 噬菌体载体 3. 病毒载体 质粒 生物学本质：细胞内染色体外的遗传物质。广泛存在于细菌细胞中，也出现在某些蓝藻、绿藻、眼虫、衣藻和真菌等细胞中。 结构特征：供价闭环双链环状DNA。 分子大小：一般为10 kb。 质粒 显性质粒与隐蔽质粒 是否能使宿主细胞呈现出新性状。 受检测手段的限制，现定为隐蔽性的质粒，未必是真正的隐蔽质粒。 常见的显性质粒 F 质粒 结合作用 R 质粒 抗生素的抗性质粒 Col质粒 大肠杆菌素合成基因 降解芳香烃、农药等毒物的降解质粒 诱导植物形成冠瘿廇的Ti质粒 质粒迁移 自然条件下，某些质粒能通过结合作用转移到新宿主细胞内。 质粒的转移受一系列基因的控制 细菌产生鞭毛，合成细胞表面物质，促使宿主细胞与受体细胞结合，导致质粒从一个细胞转移到另一个细胞 接合质粒 非接合质粒 质粒的复制 在质粒复制过程中，同时会合成阻遏物，当质粒复制到一定拷贝数