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* 3 油镜的操作方法 2 酵母菌细胞数及细胞大小的测定 5 普通光学显微镜的构造 1 4 酵母菌的形态鉴别 细菌的简单染色和革兰氏染色 了解 掌 握 熟悉 教学内容及要求 一 普通光学显微镜的构造 普通光学显微镜 机械部分 照明部分 光学部分 镜座 镜柱 镜臂 镜筒物镜转换器 镜台 调节器 反光镜 激光器 聚光镜 光圈 物镜 目镜 第一节 普通光学显微镜的使用技术 二、油镜的使用 先加一滴柏木油于标本上,从侧面看着油镜头,小心地转动粗调节扭使油镜下降,浸到镜面几乎与玻片接触 ,但不要碰到玻片 然后一面将眼转移至目镜处观察,一面向上徐徐转动粗调节扭,直到视野中出现模糊的物象,再用微调节扭调节到找到物象为止。千万不可用强力将镜头下压,这样容易压碎玻片和损坏镜头如果光线比较暗时,移动反光镜以调节光线。 使用后的处理 观察结束,应先将镜筒升高,聚光器下降,再取下切片,然后转动物镜转换器,使物镜与通光孔错开,做好清洁工作。清洁完毕,再下降镜筒,使两个物镜位于载物台上通光孔的两侧,呈“八”字形,将反光镜转至与载物台垂直,罩上防尘罩,仍用右手握住镜臂,左手平托住镜座,按号放回镜箱中。 一、细菌的简单染色 细菌形态微小,肉眼不能直接看到,必须借助显微镜(普通光学显微镜、电子显微镜)放大后才能观察。细菌体小半透明,经染色后才能较清楚的观察。 第二节 细菌形态的观察技术 细菌染色用的染料: 1、酸性染料(阴离子染料):染色离子带阴电荷,能与带阳电的物质结合,使之着色。降低菌液的pH而使细菌带阳电时,就可用酸性染料。(伊红、刚果红) 第二节 细菌形态的观察技术 2.碱性染料(阳离子染料):与带负电的物质结合,细菌一般带负电,所以细菌染色用的染料,常用碱性染料(碱性复红、美兰) 第二节 细菌形态的观察技术 3.中性染料:碱性染料和中性染料的结合物(伊红美兰、伊红天青)。 第二节 细菌形态的观察技术 单染色法:用一种染色剂对涂片进行染色。 该方法简单易行,但仅能显示细胞的外部形态,而不能鉴别其内部结构,适用于微生物形态的观察。 第二节 细菌形态的观察技术 单染色流程 二、细菌革兰氏染色 革兰氏阳性菌的细胞壁 革兰氏阴性菌的细胞壁 二、细菌革兰氏染色 有丹麦细菌学家格兰1884年发明而得名 原理:尚未完全阐明,但与细胞壁结构密切相关:等电点学说、通透性学说、化学学说。 涂片 革兰氏染色操作流程流程 干燥 固定 干燥 油镜观察 *
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