铜绿假单胞菌的耐药详解.ppt

铜绿假单胞菌耐药研究进展 1.铜绿假单胞菌的流行病学、病原学、临床意义2.铜绿假单胞菌的实验室检查3.铜绿假单胞菌感染的治疗方案4.铜绿假单胞菌的耐药机制5.研究进展 流行病学 本菌为条件致病菌，广泛存在于自然界、土壤、水、空气，在正常人皮肤（如腋下、会阴部和耳道内）、呼吸道和肠道均存在。 其生存的重要条件是潮湿环境，对外界环境抵抗力较强，湿热55℃ 、1h方能杀灭，对紫外线不敏感。 儿童带菌率比成人高,应用抗生素治疗者带菌率增高。 住院病人，特别是使用抗生素、糖皮质激素或免疫抑制剂治疗的病人，呼吸道内该菌的寄植增多。 流行病学 感染途径： 内源性：自身上呼吸道、肠道、皮肤、生殖道等 外源性：其他病人或带菌的健康工作人员，经手、飞沫或污染的医疗器械而传播。 病原学 革兰氏阴性杆菌，单个、成对或短链状排列。 多数菌株分泌绿脓菌素和荧光素，呈蓝绿色，故名绿脓杆菌。 菌体一端有1～3根鞭毛，故有动力，较活泼，无荚膜或芽胞。 专性需氧菌，生长要求不高，在普通培养基上生长良好，最适宜温度为35℃。 有很强的蛋白分解能力，但发酵糖类能力低。 致病性 临床意义 经常引起术后伤口感染，也可引起褥疮、脓肿、化脓性中耳炎等。本菌引起的感染病灶可导致血行散播，而发生菌血症和败血症。烧伤后感染了铜绿色假单胞菌可造成死亡。 本菌所致感染的临床表现取决于受累部位。 为革兰阴性菌，菌体大小（1.5～5.0)um×宽(0.5～1)um，细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛，无芽胞 分离培养 专性需氧、营养要求不高 普通培养基： 18-24h圆形 、大小不一、 边缘不整 扁平、 湿润 、金属光泽常呈融合态， 琼脂被染成绿或黄绿 。 MAC：微小无光泽半透明 48h后菌落呈棕色 血平版：扁平 湿润 有金属光泽 琼脂被染成蓝绿或灰绿 有透明溶血环 有特殊生姜气味 生化实验 该菌氧化酶阳性，能氧化分解葡萄糖和木糖，产酸不产气，但不分解乳糖和蔗糖。液化明胶、可分解尿素，还原硝酸盐为亚硝酸盐并产生氮气，吲哚阴性，利用枸橼酸盐，精氨酸双水解酶阳性。 生长实验：该菌在4℃不生长而在42℃可以生长 分型 （1）噬菌体分型：所应用的噬菌体现有24株，分型率达90%。 （2）血清学分型：利用O抗原进行分型，可分20个血清型。 （3）核酸检测：质粒指纹图谱分型、脉冲场凝胶电泳分型、其他快速分子生物学（基因芯片、PCR技术、16SrDNA分型）鉴定 常见非发酵菌初步分群鉴定 试验 假单胞 不动杆 产碱杆 黄杆 莫拉 菌属 菌 属 菌 属 菌属 菌属 氧化酶 + - + + + 葡萄糖O/F O/- O/- - O/F - 动力 + - + - - MAC平板生长 + + + +/- - 鉴定 初步鉴定 菌体形态 菌落特征 产色素 气味 氧化酶 最终鉴定 非发酵菌生化鉴定系统 API-NE试条 注意：实验室诊断应与临床表现相结合 药物治疗 传统药物治疗 耐药机制 耐药机制 1.外膜通透性减低 2.主动外排泵系统 3.抗菌药物作用的靶位的改变 4.产生灭活酶 5.生物膜（BF）的形成 1. 外膜通透性障碍 抗生素通过两种途径进入细菌外膜，亲水性抗生素的孔蛋白通道和疏水性抗生素的脂质介导通道。如果这些通道改变或缺失，抗生素将不能进入细菌到达作用靶位，从而使细菌产生耐药性。 PA的外膜通透性极低，仅为大肠埃希菌的1%-8%，这是PA对多种抗生素天然耐药的重要原因之一。β内酰胺类、四环素、氯霉素、喹诺酮类只能通过孔蛋白提供的水通道跨越外膜。 1. 外膜通透性障碍 PA外膜蛋白中的OprC、OprD、OprE是小分子亲水性抗生素进入细菌的通道，OprF形成大孔通道。孔蛋白数量的减少或基因突变影响外膜对抗生素的通透性。 孔蛋白形成的通道部分具有特异性，如OprD2孔道是亚胺培南选择性快速进入菌体的特异性通道，如果OprD2蛋白缺失或者表达减少是导致PA对亚胺培南耐药的机制之一，但对美罗培南