9.采样技能操作.docVIP

采样技能操作 一、采样器材的准备 1.标本采集器具与盛放容器：根据疫情报告情况决定标本采集的种类与数量并携带相应的采集器具与盛放容器。 1.1采集血液：一次性使用真空采血针、5ml带分离胶真空管（有特殊要求时根据要求携带）、压脉带、脉枕、棉签（短）、皮肤消毒剂（如碘伏、75%酒精等） 1.2咽拭子：尼龙棉签、10-15ml含采样液（如MEM）的螺口试管。 1.3采集粪便：棉签、C-B运送培养基、碱性蛋白胨水（疑似霍乱时）、mEC肉汤（疑似EHEC O157：H7时）。 1.4采集可疑食品：灭菌夹、灭菌饭盒等。 1.5采集可疑水样：采样器、500ml灭菌瓶等。 1.6采集尿液：15ml灭菌螺口试管。 1.7采集痰、脓液等：棉签、适宜的盛放容器如塑料盒等。特殊情况：如疑似流脑需床边接种时应携带巧克力平板及接种器材等。诸如此类的特殊情况不一一列举，请根据疫情报告决定。 2.转运设备：生物安全转运箱、冷藏冷冻设施（如冷藏背包、冰排等）。 3.防护用品：根据疫情报告携带满足生物安全防护需要的用品，如乳胶手套、隔离服等。 4.样品标识用品：标签（能牢固粘贴）、油性记号笔等。 5.一些常用物品：如酒精灯、专用医疗废物垃圾袋等。 6.样品采集记录表。 二、标本采集种类及操作技巧、注意点 标本采集的注意点： 1.针对性:尽可能采集病原微生物含量最多的部位。 2.足量：应采集到足够检测用的标本。 3.多样性：应采集各种可能作为污染源的食物和环境标本，以及各种可能含有病原体的临床标本。 4.及时性:准确把握样品采集的时机，如病原菌分离鉴定标本应尽可能在急性期和使用抗生素之前采集。 5.生物安全防护：根据疫情报告及国家的相关规定做好生物安全防护。 6.必要的沟通：采样人员与临床医生、流行病学调查人员、实验室专业人员加强沟通，使采样方案更加周密。 7.有效控制外界污染：采取措施防止交叉污染。 8.专业指导与支持：实验室专业人员应提供采样器材与采样指南，必要时派出专业人员参与采样。 9.妥善保存标本：如采取保温、冷藏、冷冻等措施，避免病原微生物死亡或降解。 10.了解一些特殊的采样要求：如因棉拭子中含有核酸扩增抑制剂，采集用于检测核酸的样本应使用灭菌人造纤维拭子或塑料棒等。 采集种类与操作技巧： 1.粪便标本：在急性腹泻期及用药前采集，挑取粘液或脓血部分，量3-5g（2-5ml）,勿混入尿液或水，无法采集粪便时可采集肛拭子。 2.咽拭子、洗漱液或痰液标本：发病第一天，最迟不超过3天采集，体温最好在38℃以上采集。肺部感染应采集痰标本，以清晨第一口痰为佳。 3.血液标本：根据检测目的决定采取全血或抗凝血，检测IgM一般采于发病1月内，检测IgG采发病初期及恢复期各一份。 4.脑脊液：于出现神经症状时采集，检测IgM采一份，检测IgG采发病初期及恢复期各一份。 5.尿液标本：应在使用抗菌药物前，晨起第一次中段尿为佳。 6.食物中毒标本：应根据现场情况和中毒患者的临床表现等线索确定采集地点和范围、环境标本和生物标本的种类及数量。 7.其它：解剖标本须由解剖专业人员操作根据现场情况采集标本。 三、标本保存与运输要求 保存要求： 1.合适的保存培养基：如需分离肠道致病菌一般置C-B运送培养基。 2.适宜的温度：如需分离脑膜炎奈瑟菌应在35-37℃保温。 3.防蒸发与保安全：标本应置于带螺旋盖的封闭容器中保存。 4.严格管理：制定严格的安全保管制度，做好样品进出、储存记录，建立档案并指定专人负责。 运输要求： 1.包装：遵循WHO对传染性物质安全运送指南（WHO，1997）进行3层包装。 2.运送：装有标本的转运箱应固定在交通工具上，车上应配备吸水材料、消毒剂等防护用品。 3.防溶血：运输前可分离血清。 4.满足标本在途中保存的温度及培养基要求。 5.安全快速。 四、快速检测 核酸检测：如荧光定量PCR 抗体检测： 1.IgM(捕获法ELISA、免疫层析、IFA) 2. IgG(间接法ELISA、IFA) 3.总抗体(双抗原夹心法ELISA) 抗原检测：如胶体金技术。 一些特殊的实验：如检测霍乱弧菌时用动力与制动实验快速检测。