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实验课题.doc
一、油樟
1、油樟油杀螨活性的研究
(1)温度和湿度对离体兔疥螨产卵、孵化和幼螨存活的影响
Influence of temperature and humidity on oviposition, hatch, and immature survival of Sarcoptes scabiei var. cuniculi in vitro
96孔ELISA培养板温度设置:5、10、15、20、25、30、35、40
湿度设置:Potassium sulphate (K2SO497.8%), potassium chloride (KCl) 85%, sodium chloride (NaCl) 75.5%, di-hydrated sodium chromate (Na2Cr2O7·2H2O) 51.2%, (K2CO3)44% and magnesium chloride (MgCl2) 32.4%
编号 雌成螨 虫卵 幼螨 若螨 存活 死亡 未孵化 孵化 存活 死亡 存活 死亡 1 2 3 . 96 从自然感染螨虫的动物体表收集螨虫,借助显微镜取生殖腔内有卵的雌螨,置于小瓶中,在不同温度和湿度条件下观察产卵情况,体外产卵后在不同温度和湿度条件下进行人工孵化,综合产卵率、孵化率、幼螨发育存活情况选择适宜的产卵和孵化的温度和湿度条件。
(2)兔疥螨体外人工培养模型的研究
The artificial feeding models of Sarcoptes scabiei var. cuniculi in vitro
皮肤、血浆、细胞培养液、
将同日孵出的幼螨接种于健康实验动物进行人工饲养,定期观察螨虫发育情况,经幼螨、若螨和成螨阶段后形成第一代螨虫,再取第一代雌螨进行体外产卵孵化,同日孵化出的幼螨接种到另一健康实验动物,所经历的幼螨、若螨、成螨为第二代螨。如法培养,3代以后的螨作为药效实验所用螨。药效实验所用螨虫采用同一时间收集,借助显微鉴定等手段确保所收集螨虫为同一发育阶段的螨虫。
(3)油樟油及其副产物杀螨活性的研究
测试药物:油樟油、99.5% 1,8-桉叶油素、99% 天然松油烯-4-醇、99% γ-松油烯、98% α-松油醇、90% β-桧烯、88%异松油烯、35% 白樟油、白油、新白油、石竹烯
对离体兔疥螨产卵、孵化和幼螨存活的影响96孔ELISA培养板1)油樟油副产物总抗氧化能力的测定
分别采用铁离子还原抗氧化剂能力分析法(ferric reducing antioxidant power,FRAP)、磷钼络合物法测定总抗氧化能力,以二叔丁基对甲酚( butylated hydroxytoluene, BHT)、抗坏血酸(Vit C)为阳性对照,每个稀释度做3次平行,测定反应后吸光度值,评价油樟油副产物总抗氧化能力。
油樟油副产物抗脂质氧化活性的研究
以甘油三酸酯、亚油酸或亚油酸甲酯、猪油、花生油为氧化反应底物,采用烘箱加速氧化法,以不加油樟油副产物的油脂为空白对照,以BHT、抗坏血酸为阳性对照,每个稀释度做3次平行,测定油脂的过氧化值(POV),评价油樟副产物抗脂质氧化的活性。
油樟油副产物清除自由基能力的研究
对DPPH自由基清除作用的测定
以DPPH(二苯代苦味酰基苯肼自由基)为清除对象,以溶剂为空白对照,以BHT、抗坏血酸为阳性对照,每个稀释度做3次平行,计算试样对DPPH的清除率和半数清除浓度,评价油樟油副产物对DPPH的清除作用。
对超氧阴离子自由基的清除作用的测定
以超氧阴离子自由基为清除对象,采用邻苯三酚自氧化法,以溶剂为空白对照,以BHT、抗坏血酸为阳性对照,每个稀释度做3次平行,计算试样对超氧阴离子自由基的清除率和半数清除浓度,评价油樟油副产物对超氧阴离子自由基的清除作用。
对羟基自由基的清除作用的测定
以羟自由基为清除对象,采用水杨酸比色法,以溶剂为空白对照,以BHT、抗坏血酸为阳性对照,每个稀释度做3次平行,计算试样对羟自由基的清除率和半数清除浓度,评价油樟油副产物对羟自由基的清除作用。
Polysaccharide
水溶性多糖
Curculigo orchioides
1、仙茅水溶性多糖分离纯化和结构鉴定的研究
2、仙茅多糖抗氧化和抗自由基的研究
3、仙茅多糖的结构鉴定
4、仙茅多糖的免疫调节作用
三、酒糟
96孔酶标板
酶标仪法测定油樟叶总黄酮抗氧化活性的研究
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