选修三知识点(人教版)解决方案.doc

专题一 基因工程 应用技术：体外DNA重组和转基因等技术 基本工具 限制性核酸内切酶 主要来源：原核生物 特点： ①识别特定的核苷酸序列（或碱基序列） ②切割特定位点上的磷酸二酯键 3、结果： 切点不在中轴线上 切点在中轴线上 （二）DNA连接酶 1、种类： ①E·coliDNA连接酶——只能连接黏性末端 ②T4DNA连接酶——可以连接黏性末端和平末端（效率较低） 2、与DNA聚合酶区别： ①DNA聚合酶发挥作用时需要DNA模板 ②DNA连接酶连接两个DNA片段（DNA片段+DNA片段）， DNA聚合酶是将脱氧核苷酸连接到DNA上（DNA片段+脱氧核苷酸） 3、载体： ①质粒——本质：小型环状双链DNA ②λ噬菌体的衍生物 ③动植物病毒 4、 必须具备什么条件才能充当载体： ①能自我复制并稳定保存 ②至少有一个限制酶切割位点 ③有特殊的标记基因 注意：基因工程中被用作载体的质粒都是经过人工改造的质粒 三、基本操作程序：目的基因的获取、基因表达载体的构建（核心）、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和鉴定。 （一）目的基因的获取 常用的方法：1、从基因文库中获取 基因组文库 部分基因文库：如cDNA文库 2、化学方法人工合成 PCR扩增技术（聚合酶链式反应）——原理：DNA双链复制 所需材料：DNA模板、引物、热稳定DNA聚合酶、4种脱氧核苷酸等 （二）基因表达载体的构建