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广州华兴康复医院医院 血库实验指导 实验一 ABO血型鉴定 一、正定型法 【目的】通过用标准血型抗体鉴定红细胞膜上ABO血型系统抗原，掌握盐水介质法进行ABO血型系统正定型的基本操作方法和结果判断。 【原理】根据IgM类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合能够出现凝集反应的原理，用已知IgM类特异性标准抗血清与被检红细胞在盐水介质中反应（室温），若出现凝集现象，表明被检红细胞膜上有与血型抗体相对应的抗原，从而判断和鉴定被检者的血型。 【器材】小试管、尖滴管、载玻片（或有凹槽的玻璃板）或白瓷板、离心机、记号笔、蜡笔、显微镜。 【试剂】标准抗A、抗B血清，生理盐水。 【标本】外周血或静脉血。 【操作】5％被检红细胞生理盐水悬液制备：抗凝血离心或红细胞自然沉降后取下层红细胞2滴于小试管中，加人生理盐水2 ml，用尖滴管将红细胞与生理盐水充分混匀，2 500r/min离心3min后弃去上清液，重复洗涤3次后自管底吸取1滴压积红细胞加入19滴生理盐水中，此即为5％的红细胞生理盐水悬液。 （一）玻片法 1．标记玻片或白瓷板 取洁净的载玻片或白瓷板1块，用蜡笔画出小格，做好编号分别标记抗A、抗B。 2．加标准抗血清 在玻片或白瓷板已标记的区域内分别滴加抗A,抗B标准抗血清各1滴。 3．加被检红细胞悬液 在滴加抗A,抗B标准抗血清的小格中分别加被检者5％红细胞生理盐水悬液各1滴，不断