肝糖原的测定提取技术分析.docVIP

实验名称 实验日期 实验地点 第1实验室 合作者 姜晨煜 指导老师 评分 教师签名 批改日期 20 实验目的1. 掌握组织样品的制备方法，了解其注意事项。 2. 了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意事项，掌握其操作方法。 3. 正确操作使用刻度吸管和可调微量取液器。 4. 熟练运用溶液混匀的各种方法（视具体情况，采用合适的混匀方法）。 5. 正确掌握溶液转移的操作。 6. 正确操作使用分光光度计。 二、实验原理Benedict reagent 中的二价铜氧化成氧化亚铜。利用上述性质，可判定组织中糖原的存在。 2.实验二原理： 糖原在浓酸中可水解成为葡萄糖，浓硫酸能使葡萄糖进一步脱水生成糠醛衍生物——5-羟甲基呋喃甲醛，此化合物再与蒽酮脱水缩合生成蓝色的化合物。该物质在620nm处有最大吸收。糖含量在 10 100 g范围内，溶液颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。利用此反应与同样处理的已知葡萄糖含量标准溶液比色，通过标准对照法（直接比较法）即可计算出样品中糖原的含量。糖原在浓碱溶液中非常稳定，故在显色之前，肝组织先置于浓碱中加热，以破坏其它成分，而保留肝糖原。 三、材料与方法以流程图示意 100℃恒温水浴箱（×）722型分光光度计，托盘天平（×1） （2） 剪刀（×1），镊子（×1），研钵（×1） （3） 试管架（×1），10mL离心管（×2），（1