实验5培养细胞的有被小泡的免疫细胞化学染色与观察创新.docVIP

中 国 海 洋 大 学 实 验 报 告 姓名：常天易 系年级：海洋生命学院2012级 专业：生物科学 科目：分子细胞生物学实验 学号：12050011006 培养细胞的有被小泡免疫细胞化学染色与观察 一、实验目的 掌握免疫细胞化学染色的基本原理和步骤； 对成笼蛋白有被小泡在细胞内的形态和分布有直观认识。 二、实验原理 　　 用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学（immunohistochemistry）技术或免疫细胞化学（immunocytochemistry）技术。 　　免疫组织化学技术是根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 　　常用的标记物有荧光素、酶和放射性同位素： 　　①、标记荧光素的称为免疫荧光法，常用的荧光素有异硫氰酸荧光素(FITC)、罗丹明(rhodamine)等。 　　②、标记酶的称为免疫酶法，常用的酶有辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase)等。 ③、标记同位素的称