DLP，一个新的DIM1蛋白家族成员-参Pre-mRNA剪接细胞周期调控.pdf

中国协和医科大学博士论文中文摘要 定位于核内，推测DLP可能在剪接和转录过程中发挥作用。 在原核细胞中表达了DLP,并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。利用制备的多克隆 抗体进行Western RNAi的质粒分别瞬时转染进MCF-7细胞，用流式细胞仪检测细胞周期的改变，发现 RNAi抑制后，S期的细胞百分比增加，G2／M期的细胞数百分比降低。用雌激素抑制剂 还能促进骨骼肌细胞C2C12的分化，诱导肌管的形成。表明DLP可能参与体内多个细 胞生物学过程。 用GST (U5—102 KD)在体外存在直接的相互作用。缺失体研究证实DLPN端的33个氨基酸是与 Prp6相互作用的区域。免疫共沉淀实验和酵母双杂实验以及菇聚焦进一步证明DLP和 Pre．mRNA Prp6的确存在相互作用。体外剪接实验证实DLP能促进剪接底物Adml-M3 的剪接。我们的研究结果表明DLP可能是一个新的参与Pre．mRNA剪接和细胞周期调 控的蛋白因子。 DLP的发现不仅提供了一个发现新的功能基因的实例，而且对于迸一步理解 和基因表达调控网络是非常有帮助的。 关键词