7病毒知识点整理教案分析.docxVIP

第七章 病毒 1 概述 定义：由或数个RNA或DNA分子构成的感染性因子，通常覆盖有有一种或数种蛋白质构成的外壳；能将其核酸从一个宿主细胞传递给另一个宿主细胞；能利用宿主的酶系统进行细胞内的复制；有些病毒还能将其基因组整合入宿主细胞DNA，依靠这种机制，或是导致持续性感染发生，或是导致细胞转化，肿瘤形成。 特点： 超显微 结构极其简单 专性活细胞内寄生 在体外能以无生命的化学大分子状态长期存在并保持其侵染活性的非细胞生物 病毒的宿主范围： 噬菌体——微生物 植物病毒——植物 动物病毒——动物 2 研究病毒学的基本方法 3 毒粒的性质 3.1 毒粒的形态结构 毒粒：是病毒的细胞外颗粒形式，也是病毒的感染性形式。 特点： 体积微小，纳米级 不同病毒的颗粒大小差别很大 多数病毒粒子的直径在100nm上下 : 最大的病毒： 　　 牛痘苗病毒——直径超过250nm 最小的病毒 　　 脊髓灰质炎病毒——28nm 直径 　　 病毒：细菌：真菌 = 1：10：100 球形颗粒或近球形: 腺病毒，脊髓灰质炎病毒，花椰菜花叶病毒 杆状颗粒或丝状 : 烟草花叶病毒，流感病毒 复杂形状颗粒 : 蝌蚪状：T偶数噬菌体 弹状：狂犬病毒 砖状：天花病毒，痘病毒 卵形：腮腺炎病毒 结构： 包膜 核酸 衣壳，由壳粒组成 病毒壳粒 壳体/衣壳：包围着病毒核酸的蛋白质外壳，是病毒毒粒的基本结构； 对称方式： 螺旋对称 ：蛋白质亚基有规律地沿着中心轴呈螺旋排列，进而形成高度有序、对称的稳定结构。（eg:烟草花叶病毒） 二十面体对称 双对称：eg:有尾噬菌体 3.2 毒粒的化学组成 毒粒的基本化学组成是核酸和蛋白质； 病毒的核酸：核酸是病毒的遗传物质；一种病毒的毒粒只含有一种核酸（DNA/RNA）； 病毒的蛋白质：在构成病毒结构、病毒的侵染性和增殖过程中发挥作用； 其它成份:糖脂、糖蛋白、脂类 4 病毒的复制 4.1 一步生长曲线： 潜伏期： 吸附期：病毒加入——吸附终止 隐蔽期：吸附终止——细胞内病毒释放开始 ——病毒释放开始 成熟期 平稳期 4.2病毒的复制周期/复制循环：一个从病毒吸附于细胞开始，到子代病毒从受染细胞释放到细胞外的病毒复制过程。 5个阶段：①吸附、②侵入、③脱壳、④病毒大分子的合成、⑤装配与释放 以原核生物的病毒——噬菌体感染为例 ①吸附：丝尖端与宿主细胞表面的特异性受体接触后，尾丝散开附着在受体上，刺突、基板固着于细胞表面； ②侵入：尾丝收缩，基板获得构象刺激，促使尾鞘收缩，尾管推出并插入细胞壁和膜中，溶菌酶水解细胞壁上的肽聚糖，头部核酸进入宿主细胞中； ③脱壳：病毒的包膜和/或壳体除去而释放病毒基因组的过程；T-偶数噬菌体脱壳与侵入一起发生，仅有病毒核酸及结合蛋白进入细胞，壳体留在细胞外。 ④病毒大分子合成：包括核酸和蛋白质的生物合成；病毒大分子的合成过程中所发生的各种病毒复制事件存在着强烈的时序性。病毒基因组的转录是分期进行； 早期转录：发生在病毒核酸复制以前的转录为早期转录，所转录的基因称作早期基因，早期基因编码的早期蛋白主要是参与病毒核酸的复制、调节病毒基因组表达，以及改变宿主细胞大分子合成的蛋白质； 晚期转录：在病毒核酸复制开始或复制后所进行的转录为晚期转录，所转录的基因称作晚期基因，晚期基因所编码的晚期蛋白主要是构成子代毒粒的结构蛋白； ⑤装配与释放：无尾丝的尾部装配、头部的装配、尾部与头部自发结合、单独装配的尾丝与已装配好的颗粒相连，通过一系列绝对有序的装配反应进行，装配成完整的病毒颗粒； 成熟的子代病毒颗粒以裂解细胞方式释放。 4.3 噬菌体较价的测定 指噬菌体的浓度，即每毫升样品含噬菌体的个数.通常是在含敏感菌的平板上形成噬菌斑进行噬菌体的计数，以每毫升中含有的噬菌斑形成单位(plaque forming unit/ml或pfu/ml)表示其效价. 例如,若每块平皿加1L稀释106倍的样品,可形成10个噬菌斑,则噬菌体效价为1010pfu/ml.(106*10*1000=1010;1ml=1000ml) 双层平板法 稀释法 融化的顶层琼脂 噬菌体稀释液 双层平板法 培育 底层营养琼脂平板 将稀释的噬菌体与（大肠杆菌）菌液混合加入融化的顶层培养基内； 接种的顶层培养基倒入底层平板上，放在台面上轻摆摇匀，使顶层培养基铺满平板； 凝固后，倒置37度培养。 双层平板法的优点： ①弥补