维生素与测定_课件.ppt

（6）比色测定　　用1cm比色杯，以石油醚调节零点，于450nm波长下，测吸光度，以其值从标准曲线上查出β－胡萝卜素的含量，供计算时使用。标准曲线绘制（7）标准曲线制备　　 取β－胡萝卜素标准使用液(浓度为50μg/mL)1.00、2.00、3.00、4.00、6.00、8.00mL，分别置于100mL具塞锥形瓶中，按样品测定步骤进行操作，点样体积为0.100mL，标准曲线各点胡萝卜素含量依次为2.50、5.00、7.50、10.00、15.00、20.00μg。以胡萝卜素含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 （8）结果计算 三、维生素E的测定 维生素E又称生育酚，属于酚类化合物。目前已经确认的有四种异构体：α、β、γ、δ生育酚和α、β、γ、δ三烯生育酚。 维生素E的测定方法有：比色法、荧光法、HPLC法等 荧光法 1原理 样品经皂化、提取、浓缩蒸干后，用正己烷溶解不皂化物。在295nm激发波长，324nm发射波长下测定其荧光强度，并与标准α-维生素E作比较，从而计算出样品中维生素E的含量。 2 操作方法 （1）样品处理 称样 皂化瓶 维生素C 无水乙醇 KOH溶液 水 分液漏斗 乙醚 分离 水层 乙醚层 醚层经无水硫酸钠过滤，氮气流真空蒸干 正已烷溶解，定容。 （2）荧光测定 激发波长：295nm 发射波长：324nm 激发