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01直接抗人球蛋白法卡式配血实验操作规程
直接抗人球蛋白法卡式配血实验操作规程
1、目的：检验供受者血液是否相合
2、适用范围：交叉配血、血型鉴定、抗体筛检血型血清学试验。
3、试剂来源：美国强生公司
4、采集与处理：
4.1 脉采血3-4ml，并观察是否溶血、乳糜血，如有此现象应再留标本并做记录。
4.2 检查留样试管、标签、标号、姓名、血型是否齐全，如有遗漏应拒收。
5、标准操作：
5.1 配置红细胞悬液：抗凝全血标本以900-1000g离心5分钟，即可得到浓度约为80%的浓缩红细胞。吸取浓缩红细胞40ul加入到2ml生理盐水中充分混匀，即得到1.5%红细胞悬液。
5.2 准备1.5%红细胞悬液和1.5%供者红细胞悬液以及供受者血浆。
5.3 现在微柱中加入50ul BLISS液，然后在主侧反应柱中加入供者红细胞悬液20ul及40ul受血者血浆，次侧反应柱中加入患者红细胞悬液及40ul供血者血浆。
5.4 37℃孵育10-30分钟；
5.5 离心并判读结果（注意离心必须在加完样30分钟内进行）
6、结果判读
阴性结果（-）：无溶血及红细胞未凝集，红细胞全部沉着与柱的底部；
阳性结果（+）：红细胞凝集，凝集后的红细胞悬浮于柱顶端。如发现溶血现象，则应先将血浆助于56℃水浴30分钟以灭活补体，然后再重复柱凝集试验，观察红细胞凝集现象。
7、结论：
阳性表示受（供）血者血清中含供（受）者红细胞血型Ag相应的Ab（IgG、IgM），供受血者不相容，阴性表示供受血者相容。
8、注意事项：
8.1 试剂卡保存温度为2-25℃，如果温控标志变红，表明卡内试剂可能失效，不宜使用；如果试剂卡保存2-8℃冰箱，使用前应先平衡温度至室温。
8.2 不使用过期试剂卡；
8.3 试剂卡被冷冻过，或卡内液体发生蒸发，可能导致假阳性结果；
8.4 避免使用外观有破损的试剂卡，例如气泡、断层、封口纸破损或颜色发生改变等；
8.5 要严格按照操作指导配置和使用红细胞悬液，不要使用被微生物污染的材料，不要使用含有颗粒物质或溶血样本，否则可能导致错误结果；
8.6 正反定型的结果要吻合，否则需要进行进一步的分析检验以明确结果不吻合的原因；
8.7 由于抗原性减弱，衰老红细胞的反应会弱于新鲜红细胞；
8.8 对于部分病例（如新生儿、老年患者或免疫功能低下的患者），其ABO抗体可能很弱或缺失；
8.9 样本中的异常血清蛋白可能会导致红细胞聚集，而被错误地盘判读为凝集。
九江市第三人民医院 标准化操作程序 文件编号： JJSY-SXK-01 第 2 版 第 2 次修改 输 血 科
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