生物制品检测复习讲义.docx

微生物限度部分: 药典中规定药品微生物限度检测时，细菌及控制菌培养温度是多少？ 30-35摄氏度 霉菌酵母菌培养温度是多少？ 23-28摄氏度 供试品检验量一般取多少？ 制备供试液所用的稀释液是什么？ PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 菌落总数和霉菌酵母菌数检测结果如何计数及报告？ 内毒素检测的原理是什么？ 如何计算最大稀释倍数？ 简述新药品做内毒素检验的流程， 如何用凝胶法判定药品内毒素是否符合要求。 色谱部分: 1、画出高效液相色谱的结构示意图见资料 2、维生素E的相对校正因子f’计算：（根据计算公式，分析色谱样品含量），其中，为已知组分维生素E标品（i）对内标物三十二烷（s）的质量相对校正因子； AS内标物（s）的峰面积； Ai已知组分（i）的峰面积； 内标物（s）的量； 待测组分（i）的量。 3、测得维生素E样品含量计算公式：其中，为待测组分（i）对内标物（s）的质量相对校正因子； AS内标物（s）的峰面积； Ai待测组分（i）的峰面积； 内标物（s）的量； 待测组分（i）的量。 题目中会给定维生素E标品量、峰面积，三十二烷内标物的量、峰面积；并给出维生素E样品峰面积，三十二烷内标物的量、峰面积。求维生素E样品量。 4、气液相色谱的比较 项目气相色谱高效液相色谱1只能分析挥发性的物质,适用于20%化合物几乎可以分析各种物质2对热不稳定物质不能使用可以用于热不稳定物质3用毛细管柱色谱可得到很高的柱效色谱柱不能很长,柱效不会很高4有很灵敏的检测器,如ECD和较灵敏的通用 检测器FID和TCDELSD为较高灵敏度的通用检测器5流动相为气体,无毒,易于处理流动相有毒,费用较高6运行和操作容易运行和操作难度大一些7仪器制造难度较小仪器制造难度较大 胶囊样品和片剂样品在我们的实验中是如何进行前处理的？ 6、异烟肼实验中，流动相是如何配制的？ 0.02mol/L磷酸氢二钠（用磷酸调节PH值至6.0）-甲醇（85：15） 电泳部分： 什么是电泳，简述DNA电泳的定性和半定量的方法？ 如何通过电泳SDS电泳进行蛋白质定性和半定量？ 并阐述条带弯曲（上样体积不平衡、电泳槽的装置不合适(玻璃板和胶组成的三明治底部有气泡或者两边隔片附近的胶聚合的不好)、在电泳槽的内槽漏液，在跑电泳的过程中到了后面胶就出现了干跑的现象、电泳电压不稳定） 无条带（胶凝的不好）和电泳速度慢的原因（ Trisglycine、电泳缓冲液 ） 酶部分： 终点测定法测定酶活性的原理和过程，分析过程中如何选择符合要求的数据进行结果分析？ 连续测定法测定酶活性的原理和过程，分析过程中如何选择符合要求的数据进行结果分析？供试品溶液测得的平均吸光度应在0.15-0.6