细胞膜微粒对血管内皮细胞功能影响研究.pdf

摘要 (研究背景)： 激素性股骨头坏死是世界性的难治疾病，股骨头微循环障碍、高 凝倾向和小血管阻塞是激素性股骨头坏死的重要发病机制之一。细胞 膜微粒(cell 胞吐作用产生的，由磷脂膜包裹的微小囊泡状结构。研究发现许多累 及血管舒张功能、高凝倾向和小血管炎症的疾病，如重症高血压、冠 心病、动脉粥样硬化等与循环系统中细胞膜微粒的种类和数量有着密 切的关系。同时细胞膜微粒参与了细胞凋亡、激活和炎症细胞募集等 多种病理生理过程。 (研究目的)： 前期实验研究目的是明确股骨头缺血性坏死和细胞膜微粒之间的 关系。高增鑫等在2007年第九届全国关节外科学术大会的发言中指 出，激素诱导的股骨头坏死患者循环系统中的细胞膜微粒与健康人有 显著差异。 本实验通过细胞膜微粒和血管内皮细胞共同培养的方法，进一步 研究细胞膜微粒对血管内皮细胞功能，特别是细胞活性和凋亡的影 响，探讨细胞膜微粒在激素相关性股骨头缺血坏死(avascular necrosisoffemoral head，ANFH)的发生机制中所起的作用。 【研究方法)： 实验对象：实验中选择体外培养的第三代人脐静脉内皮细胞 ’ (删VEC)作为研究对象。 实验刺激物：在细胞培养基中分别加入健康人、激素诱导股骨头 坏死患者、酒精诱导股骨头坏死患者和和使用大剂量激素治疗患者血 液中分离出的富含细胞膜微粒的血浆。 检测方法：细胞膜微粒和内皮细胞共同培养一段时间后倒置相差 显微镜观察细胞形态学变化，并用流式细胞仪检测细胞培养基中膜微 因的程度。 (研究结果)： 1．倒置相差显微镜观察细胞：发现各组内皮细胞的形状、密度、生 长速度和细胞核的形态没有明显差异。 2．流式细胞仪分析：共培养48小时后，培养基中细胞膜微粒数量和 种类变化：使用激素的实验组CD62E+／CD31+明显低于对照组 (P=0．035)，其他各实验组和对照组无明显差异(PO．05)。 显高于对照组(P=O．006)。使用激素的实验组高于对照组 【结论)： 1．使用激素患者的细胞膜微粒在体外有促进血管内皮细胞凋亡的作 用，因而可能在体内加重微循环障碍。 2．激素性股骨头坏死患者的细胞膜微粒在体外能够增加血管内皮细 3 胞凋亡基因的表达，但是对内皮细胞释放膜微粒无明显影响。 3．健康人和酒精性股骨头坏死患者的细胞膜微粒在体外对血管内皮 细胞的凋亡无明显影响。 【关键词)： 股骨头坏死，细胞膜微粒，内皮细胞，凋亡 ABSTRACT Background： Avascularnecrosisoffemoral aworldwide head(ANFH)is diseasewith microvascular refractory poorprognosis．And thrombosisandlocal are circulatingdeficiencyimportant inthe of pathwayspathogenesis released circulating，phospholipidsrich，submicronparticles fromthemembranesofendothelial and Ithasbeen that are erythrocytes． reportedmicropart