铜绿假单胞菌耐亚胺培南现状分子水平研究.pdfVIP

中任一药敏纸片与含酶抑制剂纸片间出现抑菌环扩大现象为协同试验阳性，提 示受试菌产金属P一内酞胺酶。在56株受试菌中，分别以EDTANa2和2-疏基丙酸 为酶抑制剂进行协同试验，结果一致，阳性均为5株，但用EDTANa2做酶抑制剂 产生的协同效应更清晰明显;4)5株协同试验阳性菌株blaVIM-2基因扩增阳性， 其他菌株扩增均阴性。将PCR扩增阳性产物纯化后进行DNA测序，经序列同源 性比较，证实5株菌所产金属0一内酞胺酶基因型均为VIM-2型。产酶株对临床常 用的p一内酞胺类抗生素均不敏感，对非0一内酞胺类抗生素如环丙沙星、庆大霉 素和氯霉素也高度耐药，对单环0-内酞胺类抗生素(氨曲南)和阿米卡星相对较 敏感。 结论:1)耐亚胺培南铜绿假单胞菌在武汉大学人民医院内的分离率有随年 度增加趋势，其主要来源为ICU病房和老年病房，主要感染部位为呼吸道和伤口 分泌物;2)耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用抗生素耐药现象十分严重，治疗此 类细菌感染宜参考微生物室的细菌药敏结果，选用敏感的抗生素，并对其加强 临床检测和监控;3)ERIC-PCR分型技术简便易行，适合于医院感染菌株的分 子流行病学研究，武汉大学人民医院2001^2002年分离的56株耐亚胺培南铜绿 假单胞菌被分为33型，其中N2,N3;N4,N49;N12,N34;N15,N19;N18, N54;N25,N56;N26,N47;N39,N48;N40,N55;N5,N43,N44;N17, N23, N31;N24,N32,N41;N30,N35,N36;N38,N42,N52;N6,N7, N9,N10,Nll分别是同一克隆的耐药菌株。4)以EDTANa2为酶抑制剂的纸片 协同法是一种简便、敏感的筛选产金属s-内酞胺酶细菌的检测方法，可作为临 床微生物室常规初筛试验;5)武汉大学人民医院临床分离铜绿假单胞菌所产金 属0一内酞胺酶为VIM-2型。产酶株呈高度多重耐药，应注意对其进行临床检测 和监控。 关键词:铜绿假单胞菌;耐药性;流行病学;0一内酞胺酶;基因型 Abstract Objective1)ToinvestigatethedrugresistanceofImipenem-resistant Pseudomonasaeruginosatoinstructclinicalapplicationofantibiotics.2)To establishaconvenientpolymerasechainreaction(尸CR)methodforbacterialDNA fingerprintsanalysisinepidemiologyresearchofImipenem-resistantPseudomonas aeruginosa.3)Toexploreandestablishasimpleandconvenientmethodfor screeningmetallo-0一lactamase-producingPseudomonasaeruginosaintheclinical microbelaboratory.4)Toinvestigatethegenotypecharacteristicsandantibiotics sensitivityofclinicalPseudomonasasaeruginosaisolatesproducingmetallo-0 -lactamase. Methods1)Imipenem-resistantPseudomonasaeruginosaisolated rfom2001 to2002wereidentifiedbyVITEK32system.Theminimalinhibitoryconcentrations (MICofthem to10antibiotics,includingImipenem,Piperacillin,Cefotaxime, Ceftazidime,Cefepime,Aztreonam,Ciprofloxacin,Gentamycin,Amikacinand Chloromycetineweredetectedbyagardilutionmethod.2)Strainsweretypedby rep-PCRwiththeprimerenterobacterrepetitiveintergenicconsensus(ERIC) followingelectrophore