食品毒理学实验分析.doc

实验一 动物的一般操作技术 1. 实验目的和要求* 毒理学研究需要用实验动物来进行各种实脸，通过对动物的实验观察和分析来研究毒作用，获得毒物的毒性、剂量-反应关系、毒作用机制等方面的资料，因此动物实验是毒理学研究中重要的手段之一。 通过本次学习毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术，掌握实验动物的选择、动物抓取和分组等技术。 2. 实验原理 做毒理学实验，首先要了解实验动物选择的要求，实验动物分组、实验样品的采集、实验动物处死方法等。 3. 实验仪器设备: 小鼠若干，手套15副，苦味酸酒精饱和液，0.5%中性红或品红溶液，棉签，解剖剪刀10把，感应量为0.1g的天平一台。 4. 实验内容步骚: (一) 健康动物的选择 无论选择哪种种属品系的动物进行实验，均要求选择健康的实验动物。健康动物检查时要求达到：外观体型丰满，被毛浓密有光泽、紧贴体表，眼睛明亮，行动迅速，反应灵活，食欲及营养状况良好。选择时重点检查以下几项： 1. 眼睛 明亮，瞳孔双侧等圆，无分泌物 2. 耳 耳道无分泌物溢出，耳壳无脓疮 3. 鼻 无喷嚏，无浆性粘液分泌物 4. 皮肤 无创伤、无脓疮、疥癣、湿疹。 5. 颈部 要求颈端端正，如有歪斜提示可能存在内耳疾患，不应选作实验动物。 6. 消化道 无呕吐、腹泄，粪便成形，肛门附近被毛洁净。 7. 神经系统 无震颤、麻痹。若动物(大鼠、小鼠)出现圆圈动作或提尾倒置呈圆圈摆动，应放弃该动物。 8. 四波及尾 四肢、趾及尾无红肿及溃疡。 (二) 实验动物的性别鉴定 小鼠 主要依据肛门与生殖孔间的距离区分，间距大者为雄鼠，小者为雌性。成年雄鼠卧位可见睾丸，雌性在腹部可见乳头。 (三) 抓取方法 正确地抓取固定动物，是为了在不损害动物健康、不影响观察指标、并防止被动物咬伤的前提下，确保实验顺利进行。 小鼠的抓取方法 先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台上向后位，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，小指按住后腿即可。 (四) 编号、标记方法 1、称重鼠的感应量在0.1g以下。 2、标记方法 染色法:采用染科(苦味酸酒精饱和液)涂擦动物皮毛标记的方法进行编号。用毛笔或棉签蘸取染料涂于动物的不同部位，以苦味酸黄色斑点染料标记来表示不同号码。一般习惯涂在左前腿为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为4，背部为5，尾基部为6，右前腿为7，右腰部为8，右后腿为9。如果动物编号超过10,需要10～100号码时，可采用在上述动物的不同部位，再涂染另一种涂料斑点，即表示相应的十位数，即左前腿为10,左腰部为20，以此类推。 实验动物的随机分组方法(随机数字表法) 为了得到客观的剂量—反应关系。应将一群动物按统计学原则随机分配到各个试验组中。 将实验单位随机分成三组 设有动物X只，随机等分成Y组。将动物编号后，按上述方法，从随机数字表抄录X个数字，将各数一律以Y除之，并以余数1,2,3……代表各组。 动物号码 1 2 3 4 5 随机数目 除Y后的余数 要使各组的动物数相等，须把原归某组的动物改配到其他组去。可以随机数字表继续按斜角线抄录一个数字，得60，以有多出的一组现有只数除之，余数为几，就可以把第几个移入其他组。 5. 注意事项: 在实验操作过程中，注意安全，以免被小鼠咬伤，防止小鼠丢失。同时要遵守实验操作规程。 6. 实验结果: 掌握实验动物的一般操作、实验样品采集、实验动物处死方法等 实验报告要求: 实验报告应包含如下内容: 原理、仪器和试剂、步骤、原始数据、计算结果。 实验二 动物染毒途径和方法 1. 实验目的要求： 掌握常用的动物染毒途径和方法。 2. 实验原理: 实验动物的一般染毒途径主要是皮下注射、皮内注射、肌内注射、静脉注射、腹腔注射、经口染毒、皮肤染毒和呼吸道染毒。 3. 实验仪器设备: 实验动物：成年、健康小鼠二 器材：注射器(0.5,1ml)、消毒棉球、手套、5Oml烧杯。 试剂：0,9%生理盐水(1OOmI,灭菌)。 4. 实验内容步骤: 染毒的途径和方法多种多样，可根据实验目的、动物种类和药物剂型等情况确定。 1. 皮下注射 注射时以左手拇指和食指提起皮肤。将连有针头的注射器刺入皮下。注射部位一般在大腿外侧、内侧、背部、耳根部、腹部。 2. 皮内注射 皮内注射时需要将注射的局部脱去被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮肤使之绷紧，在两指之间，将连有针头的注射器紧贴皮肤表层刺入皮内，然后再向上挑起并再稍刺入，即可注射药物，此时可见皮肤