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课题1 菊花的组织培养 是指在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、细胞,并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。 1、组织培养 (一)植物的组织培养的基本过程 一、基础知识 2、植物组织培养的原理 植物细胞具有全能性。(即生物体的细胞,具有使后代细胞形成完整个体的能力) (一)植物的组织培养的基本过程 一、基础知识 3、细胞分化 个体发育中,细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。 4、植物组织培养需要哪些条件? 离体、营养物质、激素和其他外界条件。 (一)植物的组织培养的基本过程 离体组织或细胞 植物体 脱分化 愈伤组织 芽 根 再分化 ③愈伤组织是通过细胞分裂形成的,其细胞排列疏松而无规则,高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。 ②脱分化(去分化):由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 ④再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫再分化。 ①外植体:离体的植物器官或组织片段。 相关名词: (一)植物的组织培养的基本过程 离体组织或细胞 植物体 脱分化 愈伤组织 芽 根 再分化 (一)植物的组织培养的基本过程 营养物质、激素、pH、温度 营养物质、激素、pH、温度、光照 (二)影响植物组织培养的因素 1、外植体的选取 2、培养基的配制(MS培养基) 3、不同植物激素浓度、使用顺序和使用量 4、pH、温度、光照等条件 (二)影响植物组织培养的因素 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 大量元素:N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等 1、外植体的选取 2、培养基的配制(MS培养基) 讨论:你能说出各种营养物质的作用吗?同专题2中微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同? 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐; 蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压; 甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞对特殊营养的需求。 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养。 3、不同植物激素浓度、使用顺序和使用量 生长素细胞分裂素比值 结果 比值高时 促根分化, 抑芽形成 比值低时 促芽分化, 抑根形成 比值适中 促进愈伤组织生长 使用顺序 实验结果 先使用生长素,后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂,但不利分化 先使用细胞分裂素后使用生长素 细胞既分裂也分化 同时使用 分化频率提高 (二)影响植物组织培养的因素 离体组织或细胞 植物体 脱分化 细胞分裂素≈生长素 愈伤组织 芽 根 细胞分裂素生长素 细胞分裂素生长素 再分化 (二)影响植物组织培养的因素 植物组织培养过程示意图 上面的示意图中还有什么地方不够完善的? 没有进行灭菌处理,试管也没有做密封等。 1、外植体带菌 2、培养基及接种器具灭菌不彻底 3、接种操作时带入 4、环境不清洁 污染途径 思 考 在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的? 1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌) 2、外植体的消毒(酒精、氯化汞) 3、接种的无菌操作(酒精、酒精灯——灼烧) 4、无菌箱中的培养; 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培 养 栽 培 移 栽 二、实验操作 作业 完成《菊花的组织培养》学案 5月10日 * * * *
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