Lec9-1_exploreproteins-st.pptVIP

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  • 2016-11-26 发布于安徽
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* 羧甲基带负电 二乙基氨基带正电 原理 亲合层析是利用蛋白质与配体专一性识别并结合的特性而分离蛋白质的一种层析方法。 将与目标蛋白质专一性结合的配体固定于支持物上,当混合样品流过此支持物时,只有目标蛋白能与配体专一性结合,而其他杂蛋白不能结合。先用结合缓冲液洗脱杂蛋白,然后改变洗脱条件,将目标蛋白洗脱下来。 Affinity Chromatography * 原理:蛋白质表面的疏水基团与介质的疏水配体的可逆相互作用,高浓度的盐增强相互作用,低浓度的盐减弱相互作用 方法:高离子强度下待分离的样品吸附在疏水介质上,然后降低离子强度选择性将样品解吸,疏水弱的物质先洗脱,疏水强的物质后洗脱。 Hydrophobic Interaction Chromatography Gel filtration by HPLC clearly defined the individual proteins because of its greater resolving power: thyroglobulin (669 kd), catalase (232 kd), bovine serum albumin (67 kd), ovalbumin (43 kd), Ribonuclease (13.4 kd) High pressure liquid chromatography

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