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探究培养液中酵母菌种群数量的变化 一、实验要求 课标中要求探究培养液中酵母菌种群数量变化 08考试说明中对该实验的要求是C级，即具备初步探究一些生物学问题、恰当评价和完善实验方案的能力。 教参中要求通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化，尝试建构种群增长的数学模型。 二、实施过程 提出问题：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？ 作出假设：鼓励学生积极大胆地提出假设，要围绕问题，提出预期结果作出符合逻辑的假设。 讨论探究思路：这是开展探究活动的重要内容之一，通过讨论能使学生明白实验设计的基本原理，在具体操作过程时做到心中有数。（根据提供的实验材料、器具和实验过程中可能出现的问题进行讨论） 制定计划：事前做好周密的计划，定程序、定时间、定人员。 实施计划：按计划确定工作流程，做好实验记录。 分析结果，得出结论：将记录的数据用曲线图表示出来，讨论分析实验的结果与假设是否一致。 三、实验中注意的问题 1.取材 菌种用高活性的酵母菌。 培养液用无菌马铃薯培养液，取材方便，而且味道不太浓。 2.酵母菌计数 利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微生物计数法。 此法的优点是直观、快速。 此法适用稀释的菌悬液（或孢子悬液），也就是液体培养基中菌体的计数。 此计数法是在显微镜下计数的，也叫做显微镜直接计数法。 此法计得的是活菌体和死菌体的总和，又称为总菌计数法。 （1）血球计数板构造： （2）计算 （3）操作步骤 稀释：将酵母菌培养液进行适当的稀释，如菌液不浓，可不必稀释。 镜检计数室：在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需要清洗后才能进行计数。 加样品：在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌的细口滴管将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘一小滴（将计数室充满即可），让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入计数室。注意不可有气泡产生。 显微镜计数： 静止5分钟后，将血球计数板置于显微镜载物台上，用低倍镜（16×10）找到计数室所在的位置。每个计数室选5个中格（选4个角和中央的中格）中的菌体进行计数。每个小格内约有5-10个菌体为宜。位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的，如遇顶角的只算右上角的菌体。如遇酵母出芽，牙体大小达到母细胞的一半时，即作为两个菌体计数。计数一个样品要从两个计数室中计得的值来计算样品的含菌量。 清洗血球计数板： 使用完毕后，将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗，切勿用硬刷洗刷，洗完后自行晾干或用吹风机吹干。镜检，观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。 实验报告： 1.结果： 将结果记录于下表。A表示五个中方格的总菌数；B表示菌液稀释倍数。 2.讨论：血球计数板上的误差主要来自哪些方面？应如何减少误差，力求准确？ （4）体会 学生对显微镜不熟悉。 学生对血球计数板不熟悉。空白的时候可以找到大格和中格，滴加菌液后就找不到了。 菌液浓度太高。一般最好的浓度是1克干酵母菌溶于5000毫升无菌水为佳。（训练血球计数板的使用） 学生数数没有耐心。 组与组之间差异很大，主要是滴加溶液时没有振荡试管。 如果镜检是发现小格内酵母菌过多，则应当稀释后在计数。 巩固练习 在计算酵母菌个数的时候经常用到血球计数板，下列说法正确的是（ ） A.血球计数板只能对活细菌计数 B.血球计数板每个计数室内的容积为1mm3 C.血球计数板在滴加样品的时候应该先滴加，后盖盖玻片 D.遇酵母出芽，牙体大小达到母细胞的一半时，即作为两个菌体计数 （3） 4.实验预测结果及结论： 利用计数板可在显微镜下对微生物细胞进行直接计数。计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻片，样品就滴在计数室内。计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0．1mL。现将lmL酵母菌样品加99mL无菌水稀释，用无菌吸管吸取少许使其自行渗入计数室，盖上盖玻片并用滤纸吸去多余菌液。 现观察到图中所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有酵母菌44个，则上述1mL酵母菌样品中约有菌体__________个。为获得较为准确的数值，减少误差，你认为可采取的做法是______________________________________________。 依据“培养液中的酵母菌种群数量变化”实验过程，请你设计一个实验，探究温度对酵母菌种群数量的影响。 1.课题： 2.实验材料：酵母菌、无菌马铃薯培养液、试管、血球计数板、滴管、显微镜、三个恒温培养箱等。 3.实验步骤： （1）把相同量的酵母菌放入三支含有相同的培养液的试管中培养，编号为1、2、3。 （2） * * 实物图 正面图