第四微生物反应动力学(制药工程)分析.pptVIP

第四章 细胞反应动力学 4.1 微生物反应过程的质量和能量衡算 4.1.1 微生物反应过程的质量衡算 微生物反应中参与反应的培养基成分多，反应途径复杂。如果把微生物反应看成是生成多种产物的复合反应： 碳源+氧+氮源=菌体+有机产物+二氧化碳+水 CHmOn+aO2+bNH3→cCHxOyNz+dCHuOvNw+eCO2+fH2O 呼吸商：细胞生长过程中放出的CO2与消耗的O2的摩尔比 4.1.2 微生物反应过程的得率系数 得率系数是对碳源等物质生成细胞或其他产物的潜力进行定量评价的重要参数。消耗1克基质生成细胞的克数称为细胞得率或生长得率。 与碳元素相关的得率系数YC：当基质为碳源，一部分被同化为细胞组成成分，其余部分被异化分解为CO2和代谢产物。 举例： C6H12O6+aO2+bNH3→cC4.4OH7.3N0.86O1.2+dH2O+eCO2 已知：葡萄糖中的碳2/3转化为细胞中的碳 计算c值 计算e值 根据原子的平衡关系计算b,d,a值 求YX/S 求YX/O 4.2 细胞生长的非结构动力学 4.2.1 细胞生长动力学描述方法 （1）微生物反应过程细胞群体 ①细菌群体的复杂性：通常1mL培养液中含有107～108个细胞，每个细胞都经历生长、成熟、衰亡的过程，同时伴有退化、变异 ②多 相：体系中有液相、固相、气相，性质不同，相内、相间有反应、传质 ③多组份：细胞组成复杂,蛋白质、脂肪、糖、核酸、维生素、无机盐、水等,培养液中的营养物，代谢产物 ④非线性：生化反应过程复杂,不能用线性方程描述 （2）细菌群体描述的简化 ①微生物反应动力学是对细菌群体而言，而不是对单一细胞 ②不考虑细胞之间的差异，性质上取平均值。此模型为确定论模型；考虑细胞之间的差异为概率论模型 ③把细胞视为单组成，忽略环境变化对菌体组成的影响，所建立的模型为非结构性模型.它是在实验数据的基础上建立的经验或半经验关联模型 ④假设细胞生长过程，各子成份均以相同的比例生长 ⑤把细胞和培养液视为一相（液相）,不考虑培养液和细胞之间的物质传递作用,即均一化模型 对细胞群体的描述模型 （3）反应速率的定义 ①绝对速率 等式两边除以X，则有： 4.4 微生物受热死亡动力学 1.微生物死亡速率 微生物受热死亡的原因主要是因高温使微生物体内的一些重要蛋白质，如酶等发生变性，从而导致微生物无法生存而死亡。 微生物受热死亡的规律有很多类型，但常见的是对数死亡律，也称对数残存律。 -dN/dt=kN 其中： N是活菌体浓度，以活菌体个数/ml K是比死亡速率常数，min-1 t是时间 对数死亡律 -dN/dt=kN ln(N/N0)=-kt N=N0exp(-kt) t=2.303×log(N/N0)/k k值反应了微生物耐热性的强弱，越小表明微生物越不易热死；反之越易热死。 dNR/dt=-kRNR dNS/dt=-krNR-kSNS kr耐热芽孢的比失活速率常数，min-1 kS耐敏感中间芽孢的比失活速率常数，min-1 联立求解微分方程组的： N/N0=kR[exp(kSt)-kS/krexp(-krt)]/(kR-kS) 2.温度对死亡速率的影响 当培养基加热灭菌时，常会出现杂菌被杀灭的同时，营养物质也被破坏，如何解决这一矛盾？ 对表达式lnK=lnA- ΔE/(RT)取微分： dlnK=- ΔE/Rd(1/T) 方程中，ΔE越大，对于同样的d(1/T)， dlnK变化越大。 微生物受热死亡的活化能一般要比营养成分热分解的活化能大的多，这就意味着当温度升高时，微生物的死亡速率要比营养成分的破坏速率增加的多，这就是为什么采用高温、瞬时灭菌-HTST (High Temperature Short Time)。 一般芽孢的ΔE约为293100J/mol，营养成分的ΔE约为83740J/mol。 嗜热脂肪芽孢杆菌的死亡和维生素B1的热分解距离： 温度从105 ℃升高到130 ℃，芽孢的K值将从0.1min-1增加至26.82min-1，增大268倍；但同样的温度变化， B1的K值从0.019min-1增加至0.117min-1，增大6.16倍。 4.5 培养基灭菌的工程设计 1.间歇灭菌 整个灭菌过程由加热、保温和冷却三个阶段组成，每一阶段均有菌体的死亡，整个间歇过程的灭菌作用是这三个阶段的总和。 三．非相关模型： 产物的生成与细胞的生长无直接关系，特点是当细胞处于生长阶段时，并无产物积累，而当细胞生长停止后，产物却大量生成 。 3×106 细菌芽孢 2~10 霉菌孢子 1~5 噬菌体和病毒 1.0 营养细胞及酵母 相对耐热性 生物体种类 各种不同微生物在含湿加热时所呈现的相对耐热性 设计灭菌操作，必须以细菌芽孢作为杀灭对象，因为