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实验一、植物根尖细胞有丝分裂和多倍体制片及观察 一、实验目的 1、学习植物根尖细胞有丝分裂和多倍体制片技术：取材，固定，染色和制片。 2、掌握有丝分裂各时期的染色体的变化和特征。 二、实验原理 有丝分裂是生物体细胞增殖的主要方式。在有丝分裂过程中，细胞核内染色体准确的复制，均等分裂，使母子细胞在遗传物质组成上达到等质等量。 高等植物的有丝分裂主要发生在根尖、茎尖及幼叶等部位的分生组织。通过对材料进行适当的固定处理，解离和染色，就可以在显微镜下观察到细胞内有丝分裂个各时期染色体的变化过程． 实验原理 有丝分裂中期的染色体长度较短，具有典型的形态特征，易于记数和分析。因此，在细胞的分裂过程中，进行药物或冰冻处理，可阻止纺锤体的形成，使细胞分裂停止在中期。同时，对组织细胞进行酸性水解或酶解处理，降解细胞之间的果胶质和细胞的纤维素壁，使细胞易于散开。 三、实验材料、器具及试剂 洋葱等根尖(2n=2x=16,2n=4x=32)。 ?显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、小瓶、滤纸等。 95％乙醇:冰醋酸＝3:1固定液； 改良苯酚品红染液 1Ｎ盐酸 * * * 遗传学实验 主讲: 孔庆军 生物工程学院 四、实验内容 1、水浸发根：25oC培养箱中。 2.材料准备与处理 (1) 2n=2x=16：待根尖长到2-3cm，一般在上午10:30左右，剪取根尖放入0.02-0.05%的秋水仙素溶液中浸泡2-4h。 (2) 2n=4x=32 ：水浸发根(根长1—1. 5 cm)左右，直接放入0.1-0.2%的秋水仙浸根2—4d，且根长为2.0—2.5cm时，进行预处理。 ３、固定：根尖放入卡诺氏固定液中处理2-24小时，分别用 95%、80%的酒精中依次脱水，最后于70%酒精4oC保存备用 ４、解离：取根尖置于青霉素小瓶水洗后，加入1 mol/l的盐酸，于65oC恒温箱中10 min；然后水洗3次
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