专题3课题1菊花的组织培讲课用.pptVIP

菊花是我国的传统名花之一。 长期以来菊花采用扦插 、嫁接等方法进行繁殖 但是这些传统的繁殖方法易受环境影响,繁殖周期长,随着市场需求的急剧增加,已经不能满足市场日益发展的需要。 细胞全能性 概念：已分化的植物细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。 基础：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质或基因。 影响植物组织培养的因素 材料的种类、年龄及保存时间长短等 营养 植物激素 PH、温度、光照等条件 （3）植物激素的影响 常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素 生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈加强的趋势 激素的使用顺序、使用的量及比例影响植物细胞的发育方向 （4）pH、温度、光照 pH控制在5.8左右 温度控制在18－22℃ 每日用日光灯照射12h 菊花的组织培养 （一）制备MS固体培养基 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒 培养温度控制在18-22℃ 每日用日光灯光照12h 正常苗 污染苗 1、外植体带菌 2、培养基及接种器具灭菌不彻底 3、接种操作时带入 4、环境不清洁 污染途径 思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？ 答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。 （四）培养 * * 百日草 万寿菊 矢车菊 鳞托菊 麦秆菊 瓜叶菊 JLSSY BYH 大波斯菊 专题3 植物组织培养技术 课题一 菊花的组织培养 有丝分裂 受精卵 细胞分化 在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。 1、细胞分化的概念 知识回顾 黑色素细胞在体外培养30多代后仍能合成黑色素；离体培养的上皮细胞，始终保持为上皮细胞，而不会变成其他类型的细胞。 2、稳定性 3、不可逆性 细胞分化发生在整个生命进程中。 1、持久性 2、细胞分化的特点 造血干细胞 原红细胞 早幼红细胞 中幼红细胞 晚幼红细胞 成熟红细胞 死亡 4、普遍性 3、细胞分化的实质 A B D C E E D C A B E D C A B E D C A B E D C A B 基因 在个体发育过程中，不同细胞中遗传信息的执行情况不同即基因的选择性表达的过程 愈伤组织 胚状体 1958，美国，斯图尔德 植物组织培养 离体 基础知识 切取 形成层 无菌接种 诱导愈伤组织 的形成 试管苗的形成 培养室 移栽 脱分化 再分化 举例 脱分化（或去分化）：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。 基本过程: 离体器官组织或细胞 植物体 愈伤组织 生芽 生根 （1）植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 （2）营养 大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等 微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等 有机物 蔗糖 甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素等 讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 生长素类： 2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA） 细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤（ 6－BA）、玉米素（ZT） 赤霉素类： 赤霉酸（GA3） 分化频率高 同时使用 细胞既分裂、也分化 先使用细胞分裂素后使用生长素 有利于细胞分裂，但不利分化 先使用生长素，后使用细胞分裂素 实验结果 使用顺序 实验结果 使用比例 生长素 细胞分裂素 生长素 细胞分裂素 生长素 细胞分裂素 ＝ 有利于根的分化 有利于芽的分化，抑制根的分化 促进愈伤组织生长 （二）外植体消毒 （三）接种 （四）培养 （五）移栽 （六）栽培 （一）制备MS固体培养基 MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4℃保存配制好的培养基母液来制备 1、配制各种母